A microminiature sequencing apparatus and method provide means for
simultaneously obtaining sequences of plural polynucleotide strands. The
apparatus comprises a microchip into which plural channels have been
etched using standard lithographic procedures and chemical wet etching.
The channels include a reaction well and a separating section. Enclosing
the channels is accomplished by bonding a transparent cover plate over the
apparatus. A first oligonucleotide strand is chemically affixed to the
apparatus through an alkyl chain. Subsequent nucleotides are selected by
complementary base pair bonding. A target nucleotide strand is used to
produce a family of labelled sequencing strands in each channel which are
separated in the separating section. During or following separation the
sequences are determined using appropriate detection means.
Μια μικρομικρογραφικές συσκευή και μια μέθοδος αλληλοuχίας παρέχουν τα μέσα για ταυτόχρονα τις ακολουθίες polynucleotide πληθυντικού σκελών. Η συσκευή περιλαμβάνει ένα μικροτσίπ στο οποίο τα κανάλια πληθυντικού έχουν χαραχτεί χρησιμοποιώντας τις τυποποιημένες λιθογραφικές διαδικασίες και τη χημική υγρή χαρακτική. Τα κανάλια περιλαμβάνουν μια αντίδραση καλά και ένα χωρίζοντας τμήμα. Να εσωκλείσει τα κανάλια ολοκληρώνεται με τη σύνδεση ενός διαφανούς πιάτου κάλυψης πέρα από τις συσκευές. Ένα πρώτο oligonucleotide σκέλος επισυνάπτεται χημικά στις συσκευές μέσω μιας αλκυλικής αλυσίδας. Οι επόμενες νουκλεοτίδες επιλέγονται με τη συμπληρωματική σύνδεση ζευγαριού βάσεων. Ένα σκέλος νουκλεοτίδας στόχων χρησιμοποιείται για να παραγάγει μια οικογένεια των επονομαζόμενων σκελών αλληλοuχίας σε κάθε κανάλι που είναι χωρισμένα στο χωρίζοντας τμήμα. Κατά τη διάρκεια ή μετά από του χωρισμού οι ακολουθίες καθορίζονται χρησιμοποιώντας τα κατάλληλα μέσα ανίχνευσης.