Mutant cell lines which have lost their ability to respond to IL-1 are provided. In one embodiment, the mutant cell line lacks or is essentially free of IL-1 receptor associate kinase (IRAK), an IL-1 signaling pathway component. The present invention also provides a method for making mutant cell lines that are unresponsive to IL-1, TNF, or to both cytokines. The method comprises the steps of: transfecting cells with a Herpes Simplex Virus thymidine kinase (HSV-TK) gene and a second gene for positive selection, each of said genes being operatively linked to an IL-1 inducible promoter or a TNF inducible promoter; selecting for transfected cells that express HSV thymidine kinase and the product of the positive selection gene in response to IL-1 or TNF; determining a gancyclovir concentration which kills the selected cells in the presence of IL-1 or TNF and which does not kill the selected cells in the absence of IL-1 or TNF; mutagenizing the selected cells using a chemical mutagenizing agent; and treating the mutagenized cells with the determined concentration of gancyclovir and IL-1 or TNF. The present invention also relates to a method of identifying domains or amino acids in IRAK that are essential for IRAK to function in the IL-1 signaling pathway.

De de cellijnen van de mutant die hun capaciteit om aan IL-1 hebben verloren te antwoorden worden verstrekt. In één belichaming, ontbreekt de lijn van de mutantcel of is hoofdzakelijk vrij van IL-1 receptor verwant kinase (IRAK), een IL-1 signalerende wegcomponent. De onderhavige uitvinding verstrekt ook een methode om de lijnen van de mutantcel te maken die aan IL-1, TNF, of aan beide cytokines koel zijn. De methode bestaat uit de stappen van: transfecting cellen met een thymidine van het Virus van de Herpes Simplexkinase (hsv-TK) gen en een tweede gen voor positieve selectie, elk van bovengenoemde genen die doeltreffend met een IL-1 afleidbare promotor of een afleidbare promotor TNF worden verbonden; het selecteren voor transfected cellen die thymidine HSV kinase en het product van het positieve selectiegen in antwoord op IL-1 of TNF uitdrukken; bepalend een gancyclovirconcentratie die de geselecteerde cellen in aanwezigheid van IL-1 doodt of TNF en die niet de geselecteerde cellen bij gebrek aan IL-1 of TNF doodt; het mutagenizing van de geselecteerde cellen die een chemische mutagenizing agent gebruiken; en behandelen mutagenized cellen met de bepaalde concentratie van gancyclovir en IL-1 of TNF. De onderhavige uitvinding heeft ook op een methode om domeinen of aminozuren in IRAK betrekking te identificeren die voor IRAK om in de IL-1 signalerende weg essentieel zijn te functioneren.