cDNAs encoding E-.alpha.-bisabolene synthase, .delta.-selinene synthase and
.gamma.-humulene synthase from Grand Fir (Abies grandis) have been
isolated and sequenced, and the corresponding amino acid sequences have
been determined. Accordingly, isolated DNA sequences (SEQ ID No:12 and SEQ
ID No:19 and SEQ ID No:23) are provided which code for the expression of
E-.alpha.-bisabolene synthase (SEQ ID No:13), .delta.-selinene synthase
(SEQ ID No:20) and .gamma.-humulene synthase (SEQ ID No: 24),
respectively, from Grand Fir (Abies grandis). In other aspects, replicable
recombinant cloning vehicles are provided which code for
E-.alpha.-bisabolene synthase, .delta.-selinene synthase and
.gamma.-humulene synthase, or for a base sequence sufficiently
complementary to at least a portion of E-.alpha.-bisabolene synthase,
.delta.-selinene synthase or .gamma.-humulene synthase DNA or RNA to
enable hybridization therewith. In yet other aspects, modified host cells
are provided that have been transformed, transfected, infected and/or
injected with a recombinant cloning vehicle and/or DNA sequence encoding
E-.alpha.-bisabolene synthase, .delta.-selinene synthase or
.gamma.-humulene synthase. Thus, systems and methods are provided for the
recombinant expression of the aforementioned recombinant sesquiterpene
synthases that may be used to facilitate their production, isolation and
purification in significant amounts. Recombinant E-.alpha.-bisabolene
synthase, .delta.-selinene synthase and .gamma.-humulene synthase may be
used to obtain expression or enhanced expression of E-.alpha.-bisabolene
synthase, .delta.-selinene synthase and .gamma.-humulene synthase in
plants, or may be otherwise employed for the regulation or expression of
E-.alpha.-bisabolene synthase, .delta.-selinene synthase and
.gamma.-humulene synthase.
DNAS het coderen van synthase E -e-.alpha.-bisabolene, delta.-selinene synthase en gamma.-humulene synthase van Grote Spar (Abies grandis) is geïsoleerd en gerangschikt, en de overeenkomstige aminozuuropeenvolgingen zijn bepaald. Dienovereenkomstig, worden de geïsoleerde opeenvolgingen van DNA (SEQ identiteitskaart No:12 en SEQ identiteitskaart No:19 en SEQ identiteitskaart No:23) verstrekt die voor de uitdrukking van synthase E -e-.alpha.-bisabolene (SEQ identiteitskaart No:13) coderen, delta.-selinene synthase (SEQ identiteitskaart No:20) en gamma.-humulenesynthase (SEQ identiteitskaart Nr: 24), respectievelijk, van Grote Spar (Abies grandis). In andere aspecten, worden replicable recombinante het klonen voertuigen verstrekt die voor synthase E -e-.alpha.-bisabolene, delta.-selinene synthase coderen en gamma.-humulene synthase, of voor een basisopeenvolging voldoende bijkomend aan minstens een gedeelte van synthase E -e-.alpha.-bisabolene, delta.-selinene synthase of van gamma.-humulenesynthase DNA of RNA om kruising daarmee toe te laten. In nog andere aspecten, worden de gewijzigde gastheercellen verstrekt die zijn omgezet, transfected, besmet en/of ingespoten met een recombinant het klonen voertuig en/of de opeenvolging van DNA coderend synthase E -e-.alpha.-bisabolene, delta.-selinene synthase of gamma.-humulene synthase. Aldus, verstrekt de systemen en de methodes voor de recombinante uitdrukking van voornoemde recombinante sesquiterpene synthases die kunnen worden gebruikt om hun productie, isolatie en reiniging in significante bedragen te vergemakkelijken. Recombinante synthase E -e-.alpha.-bisabolene, delta.-selinene synthase en gamma.-humulenesynthase kan worden gebruikt om uitdrukking of verbeterde uitdrukking van synthase te verkrijgen E -e-.alpha.-bisabolene, delta.-selinene synthase en gamma.-humulenesynthase in installaties, of kan anders voor de verordening of de uitdrukking van synthase worden aangewend E -e-.alpha.-bisabolene, delta.-selinene synthase en gamma.-humulene synthase.
