Methods of regulating gene expression in subjects using
tetracycline-responsive fusion proteins are disclosed. In one embodiment,
the method involves introducing into a cell the subject a nucleic acid
molecule encoding a fusion protein which inhibits transcription, the
fusion protein comprising a first polypeptide which binds to a tet
operator sequence, operatively linked to a heterologous second polypeptide
which inhibits transcription in eukaryotic cells; and modulating the
concentration of a tetracycline, or analogue thereof, in the subject. The
first polypeptide can binds to a tet operator sequence in the absence, but
not the presence, of tetracycline. Alternatively, the first polypeptide
can binds to a tet operator sequence in the presence, but not the absence,
of tetracycline. In another embodiment, the method of the invention
involves obtaining a cell from a subject, introducing into the cell a
first nucleic acid molecule which operatively links a gene to at least one
tet operator sequence, introducing into the cell a second nucleic acid
molecule encoding an inhibitory fusion protein of the invention to form a
modified cell, administering the modified cell to the subject and
modulating the concentration of a tetracycline, or analogue thereof, in
the subject. The first and second nucleic acid molecules can be linked or
can be separate molecules.
I metodi di regolare l'espressione del gene negli oggetti che usando le proteine tetraciclina-sensibli a reagire di fusione sono rilevati. In un incorporamento, il metodo coinvolge introdurre in una cellula l'oggetto una molecola dell'acido nucleico che mette una proteina in codice che inibisce la trascrizione, la proteina di fusione di fusione che contiene un primo polipeptide che si lega ad una sequenza dell'operatore del tet, collegato attivamente ad un secondo polipeptide eterologo che inibisce la trascrizione in cellule eukaryotic; e modulando la concentrazione di una tetraciclina, o analogo di ciò, nell'oggetto. La prima latta del polipeptide si lega ad una sequenza dell'operatore del tet in assenza, ma non alla presenza, della tetraciclina. Alternativamente, la prima latta del polipeptide si lega ad una sequenza dell'operatore del tet nella presenza, ma non all'assenza, della tetraciclina. in altro incorporamento, il metodo dell'invenzione coinvolge ottenere una cellula da un oggetto, introducente nella cellula una prima molecola dell'acido nucleico che collega attivamente un gene almeno ad una sequenza dell'operatore del tet, introducente nella cellula una seconda molecola dell'acido nucleico che mette una proteina in codice inibitoria di fusione dell'invenzione per formare una cellula modificata, amministrante la cellula modificata all'oggetto e modulante la concentrazione di una tetraciclina, o l'analogo di ciò, nell'oggetto. Le prime e seconde molecole dell'acido nucleico possono essere collegate o possono essere molecole separate.