A method of determining the concentration of glycoproteins and glycosylated
hemoglobin in whole blood and whole blood components by means of an
amperometric biosensor and an amperometric biosensor for this
determination are provided. In one embodiment, whole blood is introduced
into a version of an amperometric sensor having a component that removes
erythrocytes. Redox mediators are used to obtain a current flow based on
the oxidation of fructosamine derivatives that can be correlated with the
concentration of glycosylated proteins in the fraction of the blood from
which erythrocytes have been excluded. To obtain the concentration of
glycosylated hemoglobin, whole blood is introduced into a version of the
sensor which includes a component that produces lysis of the erythrocytes
yielding a current flow proportional to the total quality of glycosylated
proteins including glycosylated hemoglobin. The glycosyltaed hemoglobin
concentration is obtained by subtracting the glycoprotein concentration in
the absence of erythrocytes from the glycoprotein concentration of the
lysed whole blood. The sensor generally comprises a sensing electrode
having a first redox mediator dispersed in an electrically conductive
medium such as an electrically conductive graphite formulation; a
reference electrode such as a standard silver-silver chloride electrode; a
reagent strip containing a pH buffer and a second redox mediator system in
a gel medium; and a whole blood treatment component consisting of either a
membrane or other means to filter erythrocytes from whole blood or a means
to lyse erythrocytes. In a preferred form, that has high sensitivity, the
sensing electrode and the reference electrode may be formed as coatings on
separate non-conductive strips such as polyester film with these strips
arranged so that they form "the bread" of a sandwich in which the
electrode coatings are face-to-face and the reagent strip and the
filtration or lysing component form the "filling" of the sandwich. The
filtration or cell lysing component covers an opening in the reference
electrode through which samples are introduced, and is superimposed on the
reagent strip.
Une méthode de déterminer la concentration des glycoprotéines et l'hémoglobine glycosylée dans le sang entier et des composants de sang entier au moyen d'un biodétecteur ampèremétrique et un biodétecteur ampèremétrique pour cette détermination sont fournis. Dans une incorporation, le sang entier est présenté dans une version d'une sonde ampèremétrique ayant un composant qui enlève des érythrocytes. Des médiateurs redox sont habitués pour obtenir un écoulement courant basé sur l'oxydation des dérivés de fructosamine qui peuvent être corrélés avec la concentration des protéines glycosylées dans la fraction du sang duquel des érythrocytes ont été exclus. Pour obtenir la concentration de l'hémoglobine glycosylée, le sang entier est présenté dans une version de la sonde qui inclut un composant qui produit le lysis des érythrocytes rapportant un écoulement courant proportionnel à toute la qualité des protéines glycosylées comprenant l'hémoglobine glycosylée. Glycosyltaed la concentration en hémoglobine est obtenu en soustrayant la concentration en glycoprotéine en l'absence des érythrocytes de la concentration en glycoprotéine du sang entier lysé. La sonde comporte généralement une électrode de sensation faisant disperser un premier médiateur redox dans un milieu électriquement conducteur tel qu'une formulation électriquement conductrice de graphite ; une électrode de référence telle qu'une électrode standard de chlorure d'argent-argent ; une bande de réactif contenant un amortisseur de pH et un deuxième système redox de médiateur dans un milieu de gel ; et un composant de traitement de sang entier se composant d'une membrane ou d'autres moyens de filtrer des érythrocytes de sang entier ou moyens de lyser des érythrocytes. Sous une forme préférée, cela a la sensibilité élevée, l'électrode de sensation et l'électrode de référence peuvent être formées comme enduits sur les bandes non-conductrices séparées telles que le film de polyester avec ces bandes disposées de sorte qu'elles forment "le pain" d'un sandwich en lequel les enduits d'électrode sont tête à tête et la bande de réactif et la filtration ou lyser la forme composante "remplir" du sandwich. La filtration ou la cellule lysant le composant couvre une ouverture dans l'électrode de référence par laquelle des échantillons sont présentés, et est superposée à la bande de réactif.