Protoplasts which regenerate reproducibly in a short time to normal,
fertile plants can be regenerated from an auxin-autotrophic genotype of
Zea mays (L.). Starting from immature embryos on hormone-free media, an
auxin-autotrophic, embryogenic callus is formed on the shoot basis of the
seedlings, which callus retains its embryogenic potential over a
substantial period of time when subcultured on hormone-free medium. In
addition to fully-developed embryos, adventitious embryos are also formed
under suitable culture conditions (6-9% of sucrose in the medium). When
the sucrose content is reduced to 2-3% and 2,4-dichlorophenoxyacetic acid
is added, soft, granular calli are formed which consist of embryogenic
cell aggregates (type II callus). After subculturing the type II callus in
the form of a cell suspension culture, totipotent protoplasts can be
isolated. From these protoplasts, the maize plants according to the
invention are regenerated.
I protoplasti che rigenerano reproducibly in poco tempo alle piante normali e fertili possono essere rigenerati da un genotipo auxina-autotrofico di Zea maggi (L.). A partire dagli embrioni acerbi sui mezzi senza ormoni, un callo auxina-autotrofico e embryogenic è formato sulla base del tiro dei semenzali, che il callo mantiene il relativo potenziale embryogenic su un periodo notevole di tempo una volta subcoltivato sul mezzo senza ormoni. Oltre che gli embrioni fully-developed, gli embrioni avventizi inoltre sono formati negli stati adatti della coltura (6-9% di saccarosio nel mezzo). Quando il soddisfare del saccarosio è ridotto a 2-3% ed acido 2,4-dichlorophenoxyacetic è aggiunto, il calli morbido e granulare è formato che consistono dei complessi embryogenic delle cellule (tipo callo di II). Dopo la subcoltura del tipo callo di II sotto forma d'una coltura della sospensione delle cellule, i protoplasti totipotent possono essere isolati. Da questi protoplasti, le piante del mais secondo l'invenzione sono rigenerate.