Homogeneous fluorescence polarization (anisotropy) assays for detecting and quantifying metal ions in solution, based the metal-dependent binding of a fluorescent ligand to an unlabeled macromolecule, or the binding of a metal ion to a fluorescent labeled macromolecule. The metal-dependent binding of a fluorescent ligand to an unlabeled macromolecule (metallo-macromolecule) effects a measurable change in anisotropy as will the binding of metal ions to a fluorescent labeled macromolecule. Binding of the fluorescent ligand to the unlabeled macromolecule is metal dependent with the change in anisotropy being proportional to the concentration of bound metal ions. No binding of the fluorescent ligand to the macromolecule occurs in the absence of metal ions. Conversely, if the fluorescent label is first conjugated to a metallo-macromolecule and the metallo-macromolecule is subsequently stripped of its metal ion, it may then be used to transduce the binding of metal ions. Transduction is provided wherein the covalently bound fluorescent label exhibits changes in anisotropy proportional to the concentration of bound metal ions. In all methods, the change in anisotropy may be simply related to the metal ion concentration of the test solution.

Analisi omogenee di polarizzazione di fluorescenza (anisotropia) per la rilevazione e la misura degli ioni del metallo in soluzione, basate il grippaggio metallo-dipendente di un ligand fluorescente ad una macromolecola adenoida, o il grippaggio di uno ione del metallo ad una macromolecola identificata fluorescente. Il grippaggio metallo-dipendente di un ligand fluorescente ad una macromolecola adenoida (metallo-macromolecola) effettua un cambiamento misurabile nell'anisotropia come il grippaggio degli ioni del metallo ad una macromolecola identificata fluorescente. Legandosi del ligand fluorescente alla macromolecola adenoida è dipendente del metallo con il cambiamento nell'anisotropia che è proporzionale alla concentrazione degli ioni rilegati del metallo. Nessun grippaggio del ligand fluorescente alla macromolecola si presenta in assenza degli ioni del metallo. Per contro, se l'etichetta fluorescente in primo luogo si coniuga ad una metallo-macromolecola e la metallo-macromolecola successivamente è messa a nudo del relativo ione del metallo, può allora essere usato a transduce il grippaggio degli ioni del metallo. Transduction è fornito in cui l'etichetta fluorescente in covalenza limitata esibisce i cambiamenti nell'anisotropia proporzionale alla concentrazione degli ioni rilegati del metallo. In tutti i metodi, il cambiamento nell'anisotropia può essere collegato semplicemente con la concentrazione nello ione del metallo della soluzione della prova.