The sensitivity and specificity of polynucleotide synthesis is increased by protecting the 3'-end of an oligonucleotide used as a primer in the synthesis of the polynucleotide. Protection of the 3'-end of an oligonucleotide prevents non-specific chain elongation. Removal of blocking group an elevated temperature, using a thermostable enzyme, permits template-specific polynucleotide synthesis. The present invention also provides oligonucleotides with a 3' end protected by a blocking group and a thermostable enzyme capable of removing the blocking group at an elevated temperature. The compositions and methods of the invention are very useful in a variety of techniques for DNA/RNA amplification and analysis, including medical genetics research and diagnosis, pathogen detection, forensic, and animal and plant genetics applications, among others.

De gevoeligheid en de specificiteit van polynucleotidesynthese worden door het 3'-eind van oligonucleotide verhoogd te beschermen die als inleiding in de synthese van het polynucleotide wordt gebruikt. De bescherming van het 3'-eind van oligonucleotide verhindert niet-specifieke kettingsverlenging. Verwijdering die van het blokkeren van groep een opgeheven temperatuur, een thermostable enzym de gebruikt, laat malplaatje-specifieke polynucleotidesynthese toe. De onderhavige uitvinding voorziet ook oligonucleotides van ' eind 3 dat door een blokkerende groep wordt beschermd en een thermostable enzym geschikt om de blokkerende groep bij een opgeheven temperatuur te verwijderen. De samenstellingen en de methodes van de uitvinding zijn zeer nuttig in een verscheidenheid van technieken voor DNA/de versterking en de analyse van RNA, met inbegrip van medische van de geneticaonderzoek en diagnose, van de ziekteverwekkeropsporing, gerechtelijke, en van de dieren en plant genetica toepassingen, onder anderen.