Methods are provided for the preparation of transfection complexes of
polynucleotides and polycations, especially cationic lipids, suitable for
delivering polynucleotides to cells. In particular, methods are provided
for preparing transfection complexes using a reduced-volume, dual-feed
process. Complexes are formed upon the collision of two feed stream,
containing polynucleotides and polycation, respectively, under conditions
resulting in turbulent mixing conditions in minimal volume, and removal of
transfection complexes under laminar flow conditions. Alternatively, the
components are mixed in a static mixer. The process is easily scaleable
and highly reproducible.
Os métodos são fornecidos para a preparação de complexos do transfection dos polynucleotides e dos polycations, especial lipids cationic, apropriados para entregar polynucleotides às pilhas. No detalhe, os métodos são fornecidos preparando complexos do transfection usando um reduz-volume, processo dual-feed. Os complexos são dados forma em cima da colisão do córrego da alimentação dois, contendo polynucleotides e polycation, respectivamente, sob circunstâncias tendo por resultado circunstâncias misturando turbulent no volume mínimo, e na remoção de complexos do transfection sob circunstâncias laminar do fluxo. Alternativamente, os componentes são misturados em um misturador de estática. O processo é fàcilmente scaleable e altamente reproducible.