A method for quantitatively measuring nucleic acid amplification reactions, especially the polymerase chain reaction, employing microparticles as hybridization solid phase, a probe sequence labeled with a fluorescent label and a fluorescence detection system which is based on two-photon fluorescence excitation, contacting all the amplification reaction components and the solid phase simultaneously in a closed cuvette, performing the amplification reactions in the same cuvette, focusing a two-photon exciting laser beam into the cuvette during the amplification cycles and measuring the fluorescence signal emitted by the microparticles from one particle at a time when they randomly float through the focal volume of the laser beam. The features of this invention allow a method and device for performing a fast quantitative nucleic acid amplification assay of single or multiple target sequences in a very small closed sample volume.

Μια μέθοδος για ποσοτικά τις αντιδράσεις ενίσχυσης νουκλεϊνικού οξέος, ειδικά η αλυσιδωτή αντίδραση πολυμεράσεων, που χρησιμοποιούν τα μικρομόρια ως στερεά φάση υβριδοποίησης, μια ακολουθία ελέγχων που ονομάζονται με μια φθορισμού ετικέτα και ένα σύστημα ανίχνευσης φθορισμού που είναι βασισμένο στη διέγερση φθορισμού δύο-φωτονίων, ερχόμενος σε επαφή με όλα τα τμήματα αντίδρασης ενίσχυσης και τη στερεά φάση ταυτόχρονα σε έναν κλειστό δοκιμαστικό σωλήνα, που εκτελεί τις αντιδράσεις ενίσχυσης στον ίδιο δοκιμαστικό σωλήνα, που στρέφουν μια ακτίνα λέιζερ διέγερσης δύο-φωτονίων στο δοκιμαστικό σωλήνα κατά τη διάρκεια των κύκλων ενίσχυσης και μέτρηση του σήματος φθορισμού που εκπέμπεται από τα μικρομόρια από ένα μόριο σε μία εποχή που επιπλέουν τυχαία μέσω του εστιακού όγκου της ακτίνας λέιζερ. Τα χαρακτηριστικά γνωρίσματα αυτής της εφεύρεσης επιτρέπουν μια μέθοδο και μια συσκευή για μια γρήγορη ποσοτική δοκιμή ενίσχυσης νουκλεϊνικού οξέος των ενιαίων ή πολλαπλάσιων ακολουθιών στόχων σε έναν πολύ μικρό κλειστό όγκο δειγμάτων.