Through function complementation of E. coli auxotrophs, the ultimate and
pentultimate enzymes of the spinach riboflavin biosynthetic pathway have
been cloned, namely, lumazine synthase (LS) and riboflavin synthase (RS).
This invention relates to the isolation of nucleic acid fragments from
plants or fungi that encode LS protein. The invention also relates to the
isolation of nucleic acid fragments from plants or fungi that encode RS
protein. In addition, the invention also relates to the construction of
chimeric genes encoding all of a portion of LS, in sense or antisense
orientation, wherein the expression of the chimeric gene results in
production of altered levels of plant LS in a transformed host cell.
Furthermore, the invention also relates to the construction of chimeric
genes encoding all of a portion of RS, in sense or antisense orientation,
wherein the expression of the chimeric gene results in production of
altered levels of plant or fungal RS in a transformed host cell. In vivo
and in vitro methods to identify herbicide or fungicide candidates are
included that evaluate the ability of a chemical compound to inhibit the
activity of a plant or fungal LS enzyme or a plant or fungal RS enzyme.
Com a complementação da função de auxotrophs do E. coli, os enzymes finais e do pentultimate do pathway biosynthetic do riboflavin do spinach cloned, a saber, o synthase do lumazine (LS) e o synthase do riboflavin (RS). Esta invenção relaciona-se à isolação de fragmentos do ácido nucleic das plantas ou dos fungos que codificam a proteína do LS. A invenção relaciona-se também à isolação de fragmentos do ácido nucleic das plantas ou dos fungos que codificam a proteína de RS. Além, a invenção relaciona-se também à construção dos genes chimeric que codificam toda a parcela do LS, na orientação do sentido ou do antisense, wherein a expressão do gene chimeric resulta na produção de níveis alterados da planta LS em uma pilha de anfitrião transformada. Além disso, a invenção relaciona-se também à construção dos genes chimeric que codificam toda a parcela de RS, na orientação do sentido ou do antisense, wherein a expressão do gene chimeric resulta na produção de níveis alterados da planta ou em RS fungal em uma pilha de anfitrião transformada. Em vivo e nos métodos de vitro para identificar candidatos do herbicide ou do fungicide seja incluído que avalíe a abilidade de um composto do produto químico de inibir a atividade de uma planta ou de um enzyme fungal do LS ou de um enzyme do planta ou o fungal de RS.