A recombinant baculovirus, which produces a recombinant polyhedra made up
of a baculovirus polyhedrin (PH), a Bacillus thuringiensis crystal protein
(CP) and jellyfish Aequorea victoria green fluorescent protein (GFP), is
constructed by introducing a transfer vector carrying a fusion gene
encoding a fusion protein in which the PH, the CP and the GFP are directly
linked from N-terminal to C-terminal, in sequence, and a wild-type
baculovirus into an insect cell, simultaneously, and culturing the cell.
This baculovirus transfer vector pColorBtrus is constructed by
synthesizing the GFP-coding DNA fragment from plasmid pGFP, the PH gene
from wild-type Autographa californica Nucleopolyhedrovirus, and a Cry1Ac
gene from plasmid pPN6.6 carrying a Bacillus thuringiensis Cry1Ac gene by
polymerase chain reactions, and inserting first the GFP-coding DNA
fragment and the PH gene in baculovirus expression vector pAcUW31 in such
a way that the 5'-end of the GFP-coding DNA fragment is linked to the
3'-end of the PH gene and then, the Cry1Ac gene between the PH gene and
the GFP-coding DNA fragment. The recombinant virus can kill insect pests
with high pathogenicity within a short time, and is equipped with a
monitoring device for infected insects, so that it can be prevented from
being overused.
Un baculovirus recombinant, que produce poliedros recombinant compuso de un polyhedrin del baculovirus (pH), de un bacilo proteína cristalina del thuringiensis (CP) y proteína fluorescente verde de Aequorea victoria de las medusas (GFP), es construido introduciendo un vector de la transferencia que llevaba un gene de la fusión que codificaba una proteína de la fusión en la cual el pH, el CP y los GFP se ligan directamente del N-terminal al C-terminal, en secuencia, y de un salvaje-tipo baculovirus en una célula del insecto, simultáneamente, y cultivando la célula. Este pColorBtrus del vector de la transferencia del baculovirus es construido sintetizando el fragmento de la DNA de la GFP-codificacio'n del pGFP del plasmid, el gene del pH del salvaje-tipo californica Nucleopolyhedrovirus de Autographa, y un gene de Cry1Ac del plasmid pPN6.6 que lleva un bacilo gene de Cry1Ac del thuringiensis por reacciones en cadena de la polimerasa, e insertando primero el fragmento de la DNA de la GFP-codificacio'n y el gene del pH en el vector pAcUW31 de la expresión del baculovirus de una manera tal que los 5'-extremos del fragmento de la DNA de la GFP-codificacio'n estén ligados a los 3'-extremos del gene del pH y entonces, el gene de Cry1Ac entre el gene del pH y el fragmento de la DNA de la GFP-codificacio'n. El virus recombinant puede matar a parásitos del insecto con alto pathogenicity dentro de un tiempo corto, y se equipa de un dispositivo de supervisión para los insectos infectados, para poderlo prevenir de ser usado en exceso.