Disclosed are photometric methods and devices for determining optical
pathlength of liquid samples containing analytes dissolved or suspended in
a solvent. The methods and devices rely on determining a relationship
between the light absorption properties of the solvent and the optical
pathlength of liquid samples containing the solvent. This relationship is
used to establish the optical pathlength for samples containing an unknown
concentration of analyte but having similar solvent composition. Further
disclosed are methods and devices for determining the concentration of
analyte in such samples where both the optical pathlength and the
concentration of analyte are unknown. The methods and devices rely on
separately determining, at different wavelengths of light, light
absorption by the solvent and light absorption by the analyte. Light
absorption by the analyte, together with the optical pathlength so
determined, is used to calculate the concentration of the analyte. Devices
for carrying out the methods particularly advantageously include
vertical-beam photometers containing samples disposed within the wells of
multi-assay plates, wherein the photometer is able to monitor light
absorption of each sample at multiple wavelengths, including in the
visible or UV-visible region of the spectrum, as well as in the
near-infrared region of the electromagnetic spectrum. Novel photometer
devices are described which automatically determine the concentration of
analytes in such multi-assay plates directly without employing a standard
curve.
Αποκαλύπτονται οι φωτομετρικές μέθοδοι και οι συσκευές για οπτικό pathlength των υγρών δειγμάτων που περιέχουν τα κατάλοιπα που διαλύονται ή που αναστέλλονται σε έναν διαλύτη. Οι μέθοδοι και οι συσκευές στηρίζονται στον καθορισμό μιας σχέσης μεταξύ των ιδιοτήτων ελαφριάς απορρόφησης του διαλύτη και οπτικό pathlength των υγρών δειγμάτων που περιέχουν το διαλύτη. Αυτή η σχέση χρησιμοποιείται για να καθιερώσει οπτικό pathlength για τα δείγματα που περιέχουν μια άγνωστη συγκέντρωση του καταλοίπου αλλά που έχουν την παρόμοια διαλυτική σύνθεση. Περαιτέρω αποκαλύπτονται οι μέθοδοι και οι συσκευές για τη συγκέντρωση του καταλοίπου σε τέτοια δείγματα όπου και οπτικό pathlength και η συγκέντρωση του καταλοίπου είναι άγνωστα. Οι μέθοδοι και οι συσκευές στηρίζονται χωριστά να καθορίσουν, στα διαφορετικά μήκη κύματος της ελαφριάς, ελαφριάς απορρόφησης από τη διαλυτική και ελαφριά απορρόφηση από το κατάλοιπο. Η ελαφριά απορρόφηση από το κατάλοιπο, μαζί με οπτικό pathlength που καθορίζεται έτσι, χρησιμοποιείται για να υπολογίσει τη συγκέντρωση του καταλοίπου. Οι συσκευές για τις μεθόδους ιδιαίτερα ευνοϊκά περιλαμβάνουν τα φωτόμετρα κάθετος-ακτίνων που περιέχουν τα δείγματα που διατίθενται μέσα στα φρεάτια των πιάτων πολυ-δοκιμής, όπου το φωτόμετρο είναι σε θέση να ελέγξει την ελαφριά απορρόφηση κάθε δείγματος στα πολλαπλάσια μήκη κύματος, που περιλαμβάνουν στην ορατή ή UV-ORATI' περιοχή του φάσματος, καθώς επίσης και στη near-infrared περιοχή του ηλεκτρομαγνητικού φάσματος. Οι νέες συσκευές φωτόμετρων περιγράφονται που καθορίζουν αυτόματα τη συγκέντρωση των καταλοίπων σε τέτοια πιάτα πολυ-δοκιμής άμεσα χωρίς χρησιμοποίηση μιας τυποποιημένης καμπύλης.