The invention is directed to methods for the non-radioactive labeling,
detection, quantitation and isolation of nascent proteins translated in a
cellular or cell-free translation system. tRNA molecules are
misaminoacylated with non-radioactive markers which may be non-native
amino acids, amino acid analogs or derivatives, or substances recognized
by the protein synthesizing machinery. Markers may comprise cleavable
moieties, detectable labels, reporter properties wherein markers
incorporated into protein can be distinguished from unincorporated
markers, or coupling agents which facilitate the detection and isolation
of nascent protein from other components of the translation system. The
invention also comprises proteins prepared using misaminoacylated tRNAs
which can be utilized in pharmaceutical compositions for the treatment of
diseases and disorders in humans and other maninials, and kits which may
be used for the detection of diseases and disorders.
Η εφεύρεση κατευθύνεται στις μεθόδους για το μη-ραδιενεργό μαρκάρισμα, ανίχνευση, ο ποσοτικός προσδιορισμός και η απομόνωση των δημιουργούμενων πρωτεϊνών που μεταφράζονται ένα στα κυψελοειδή ή χωρίς κύτταρα μόρια συστημάτων tRNA μεταφράσεων είναι με τους μη-ραδιενεργούς δείκτες που μπορούν να είναι μη ιθαγενή αμινοξέα, ανάλογα ή παράγωγα αμινοξέος, ή ουσίες που αναγνωρίζονται από την πρωτεϊ'νη συνθέτοντας τα μηχανήματα. Οι δείκτες μπορούν να περιλάβουν τις διασπάσιμες μερίδες, τις ανιχνεύσιμες ετικέτες, τις ιδιότητες δημοσιογράφων όπου οι δείκτες που ενσωματώνονται στην πρωτεϊ'νη μπορούν να διακριθούν από τους ασυγχώνευτους δείκτες, ή τους πράκτορες συζεύξεων που διευκολύνουν την ανίχνευση και την απομόνωση της δημιουργούμενης πρωτεϊ'νης από άλλα συστατικά του συστήματος μεταφράσεων. Η εφεύρεση περιλαμβάνει επίσης έτοιμη την πρωτεϊ'νες χρησιμοποίηση tRNAs που μπορούν να χρησιμοποιηθούν στις φαρμακευτικές συνθέσεις για τη θεραπεία των ασθενειών και των αναταραχών στους ανθρώπους και άλλα maninials, και οι εξαρτήσεις που μπορούν να χρησιμοποιηθούν για την ανίχνευση των ασθενειών και των αναταραχών.
