Disclosed is a method for obtaining glucose-regulated expression of active
insulin in the cells of a mammalian subject. The method involves
delivering into the subject a genetic construct comprising a coding
sequence for a human proinsulin operably connected a promoter functional
in the host cells. The construct includes a glucose responsive regulatory
module having at least one glucose inducible regulatory element comprising
a pair of CACGTG motifs linked by a five base nucleotide sequence, which
confers glucose inducible expression of the proinsulin coding sequence. To
ensure proper processing of the proinsulin to active insulin, the coding
sequence was modified to direct the synthesis of a mutant proinsulin
polypeptide having amino acid sequences that can be cleaved to mature
insulin in suitable host cells, such as hepatocytes.
Показан метод для получать глюкоз-otregulirovannoe выражение активно инсулина в клетках mammalian вопроса. Метод включает поставить в вопрос генетическая, котор стройка состоя из последовательности кодирвоания для людского proinsulin operably соединила promoter функциональный в ведущих ячейках. Стройка вклюает модуль глюкозы отзывчивый регламентационный имея по крайней мере один элемент глюкозы индуцибильный регламентационный состоять из пары motifs CACGTG соединенных низкопробной последовательностью нуклеотида 5, которая совещается выражение глюкозы индуцибильное последовательности кодирвоания proinsulin. Для того чтобы обеспечить правильный обрабатывать proinsulin к активно инсулину, последовательность кодирвоания была доработана для того чтобы сразу синтез полипептида proinsulin мутанта имея последовательности amino acid которые можно расколоть для того чтобы созреть инсулин в целесообразных ведущих ячейках, such as hepatocytes.