DNA constructs are provided for stable transformation of plastids of multicellular plants and expression of foreign proteins in plastids. The DNA constructs comprise a transforming DNA which is targeted to a pre-determined location on the plastid genome and inserted into the plastid genome by homologous recombination with targeting segments comprising DNA sequences homologous to the pre-determined region of the plastid genome. The transforming DNA contains a non-lethal selectable marker gene which confers a selectable phenotype on cells having plastids in which substantially all of the genomes therein contain the transforming DNA (i.e., homoplasmic cells or tissues). The transforming DNA further comprises at least one insertion site 4 for an additional DNA segment, such as a gene encoding a protein for improving a characteristic of the transformed plant. The non-lethal selectable marker gene is preferably provided as a chimeric gene by assembly from an expression cassette comprising 5' and 3' regulatory segments, preferably derived from plastid genes. A coding segment encoding the non-lethal selectable marker is inserted between the 5' and 3' regulatory segments to form the chimeric gene. The non-lethal selectable marker coding segment preferred in the present invention is the coding region of aadA from bacteria, which encodes aminoglycoside 3"-adenylyltransferase to confer spectinomycin and streptomycin resistance.

As construções do DNA são fornecidas para a transformação estável dos plastids de plantas multicellular e da expressão de proteínas extrangeiras nos plastids. As construções do DNA compreendem um DNA de transformação que seja alvejado a uma posição pre-determined no genome do plastid e introduzido no genome do plastid pelo recombination homologous com escolha de objectivos dos segmentos que compreendem as seqüências do DNA homologous à região pre-determined do genome do plastid. O DNA de transformação contem um gene selecionável non-lethal do marcador que conferencie um phenotype selecionável nas pilhas que têm os plastids em que substancialmente todos os genomes contêm nisso o DNA de transformação (isto é, pilhas ou tecidos homoplasmic). O DNA de transformação compreende mais mais ao menos um local 4 da inserção para um segmento adicional do DNA, tal como um gene que codifica uma proteína para melhorar uma característica da planta transformada. O gene selecionável non-lethal do marcador é fornecido preferivelmente como um gene chimeric pelo conjunto de uma gaveta da expressão que compreende os segmentos 5' e 3' regulatory, derivados preferivelmente dos genes do plastid. Um segmento de coding que codifica o marcador selecionável non-lethal é introduzido entre os segmentos 5' e 3' regulatory para dar forma ao gene chimeric. O segmento de coding selecionável non-lethal do marcador preferido na invenção atual é a região do coding do aadA das bactérias, que codifica o aminoglycoside 3"-adenylyltransferase para conferenciar resistência do spectinomycin e do streptomycin.