This is a method for reproducing in vitro the RNA-dependent RNA polymerase
activity associated with hepatitis C virus. The method is characterized in
that sequences contained in NS5B are used in the reaction mixture. The
terminal nucleotidyl transferase activity, a further property of the NS5B
protein, can also be reproduced using this method. The method takes
advantage of the fact that the NS5B protein, either purified to apparent
homogeneity or present in extracts of overproducing organisms, can
catalyze the addition of ribonucleotides to the 3'-termini of exogenous or
endogenous RNA molecules. The invention also relates to a composition of
matter that comprises sequences contained in NS5B, and to the use of these
compositions for the set up of an enzymatic test capable of selecting, for
therapeutic purposes, compounds that inhibit the enzymatic activity
associated with NS5B.
Esto es un método para reproducir in vitro la actividad RNA-dependiente de la polimerasa del RNA asociada al virus de la hepatitis C. El método se caracteriza en que las secuencias contenidas en NS5B están utilizadas en la mezcla de reacción. La actividad terminal del transferase del nucleotidyl, otra característica de la proteína de NS5B, se puede también reproducir usando este método. El método se aprovecha del hecho de que la proteína de NS5B, purificada a la homogeneidad o al presente evidente en los extractos de organismos overproducing, puede catalizar la adición de ribonucleotides al 3'-termini de las moléculas exógenas o endógenas del RNA. La invención también se relaciona con una composición de la materia que abarca las secuencias contenidas en NS5B, y con el uso de estas composiciones para el sistema para arriba de una prueba enzimática capaz de seleccionar, para los propósitos terapéuticos, de los compuestos que inhiban la actividad enzimática asociada a NS5B.