A method for enhancing and/or increasing the efficiency of repair of
tissues, primarily bone or cartilage, using genetically engineered cells
has been developed. In the preferred embodiment, mesenchymal stem cells
are isolated from periosteum tissue, and transfected with the gene
encoding a growth factor for the particular cell type to be repaired. For
example, for repair of bone, a gene (or genes) encoding bone morphogenic
protein is transfected into periosteal cells. The transfected periosteal
cells then express the bone morphogenic protein in culture to promote bone
repair as a function of the expressed bone morphogenic protein. Cells can
be transfected using any appropriate means, including viral vectors, as
shown by the example, chemical transfectants, or physico-mechanical
methods such as electroporation and direct diffusion of DNA. Genes can
encode any useful protein, for example, a specific growth factor,
morphogenesis factor, a structural protein, or a cytokine which enhances
the temporal sequence of wound repair, alters the rate of proliferation,
increases the metabolic synthesis of extracellular matrix proteins, or
directs phenotypic expression in endogenous cell populations.
Representative genes encoding proteins include bone growth factor genes,
cartilage growth factor genes, nerve growth factor genes, and general
growth factors important in wound healing, such as platelet-derived growth
factor (PDGF), vascular endothelial growth factor (VEGF), insulin-like
growth factor (IGF-1), epidermal growth factor (EGF), basic fibroblast
growth factor (FGF), endothelial derived growth supplement.
Μια μέθοδος για ή/και την αποδοτικότητα της επισκευής των ιστών, πρώτιστα κόκκαλο ή χόνδρος, που χρησιμοποιεί τα γενετικά κατασκευασμένα κύτταρα έχει αναπτυχθεί. Στην προτιμημένη ενσωμάτωση, τα mesenchymal κύτταρα μίσχων είναι απομονωμένα από periosteum τον ιστό, και με το γονίδιο που κωδικοποιεί έναν παράγοντα αύξησης για τον ιδιαίτερο τύπο κυττάρων που επισκευάζεται. Παραδείγματος χάριν, για την επισκευή του κόκκαλου, ένα κωδικοποιώντας κόκκαλο γονιδίων (ή γονιδίων) που η morphogenic πρωτεϊ'νη είναι στα περιοστικά κύτταρα. Τα περιοστικά κύτταρα κατόπιν εκφράζει τη morphogenic πρωτεϊ'νη κόκκαλων στον πολιτισμό για να προωθήσει την επισκευή κόκκαλων ως λειτουργία της εκφρασμένης morphogenic πρωτεϊ'νης κόκκαλων. Τα κύτταρα μπορούν να είναι η χρησιμοποίηση οποιωνδήποτε κατάλληλων μέσων, συμπεριλαμβανομένων των προερχόμενων από ιό διανυσμάτων, όπως παρουσιάζονται με το παράδειγμα, τα χημικά transfectants, ή τις φυσικομηχανικές μεθόδους όπως ο ηλεκτρομετασχηματισμός και η άμεση διάχυση του DNA. Τα γονίδια μπορούν να κωδικοποιήσουν οποιαδήποτε χρήσιμη πρωτεϊ'νη, παραδείγματος χάριν, ένας ειδικός παράγοντας αύξησης, παράγοντας μορφογένεσης, μια δομική πρωτεϊ'νη, ή ένα cytokine που ενισχύει τη χρονική ακολουθία επισκευής πληγών, αλλάζει το ποσοστό πολλαπλασιασμού, αυξάνει τη μεταβολική σύνθεση των extracellular πρωτεϊνών μητρών, ή κατευθύνει τη φαινοτυπική έκφραση στους ενδογενείς πληθυσμούς κυττάρων. Τα αντιπροσωπευτικά γονίδια που κωδικοποιούν τις πρωτεϊ'νες περιλαμβάνουν τα γονίδια παράγοντα αύξησης κόκκαλων, τα γονίδια παράγοντα αύξησης χόνδρου, τα γονίδια παράγοντα αύξησης νεύρων, και τους γενικούς παράγοντες αύξησης σημαντικούς στη θεραπεία πληγών, όπως ο αιμοπετάλιο-παραγόμενος παράγοντας αύξησης (PDGF), αγγειακός endothelial παράγοντας αύξησης (VEGF), ινσουλίνη-όπως παράγοντας αύξησης (ηγφ-1), επιδερμικός παράγοντας αύξησης (EGF), βασικός παράγοντας αύξησης ινοβλάστεων (FGF), endothelial παραγόμενο συμπλήρωμα αύξησης.