The invention describes the expression of a human immunodeficiency virus
(HIV) type 1 provirus (F12-HIV) cloned from a nonproducer,
chronically-infected CD4 down-regulated Hut-78 cell clone (F12) which does
not lead to the formation of viral particles and, upon transfection in
HeLa CD4.sup.+ cells, confers resistance to HIV superinfection without
affecting CD4 receptor exposure. A Moloney murine leukemia virus-based
retroviral vector containing an F12-HIV genome lacking the 3' long
terminal repeat (LTR) and part of the nef gene, expressed under the
control of its 5' LTR, was constructed to facilitate the transfer of the
anti-HIV properties of F12-HIV into human cells. The F12-HIV genome was
inserted in an orientation opposite to that of the murine leukemia virus
transcriptional unit and was designated the N2/F12-HIV nef.sup.- antisense
vector. Lymphoblastoid CEMss cells, as well as human peripheral blood
lymphocytes, were successfully transduced by the recombinant retrovirus.
CEMss clones expressing the F12-HIV nef.sup.- antisense vector were
resistant to HIV superinfection even at the highest multiplicity of
infection tested (10.sup.5 50% tissue culture infective doses per 10.sup.6
cells). Nonproducer, interfering HIV proviruses transduced into retroviral
vectors may provide an alternative strategy for the protection of
CD4.sup.+ human primary cells from HIV infection.
A invenção descreve a expressão de um tipo humano 1 provirus do vírus do immunodeficiency (HIV) (F12-HIV) cloned de um nonproducer, o clone para baixo-regulado CD4 crônico-chronically-infected da pilha Hut-78 (F12) que não conduz à formação de partículas viral e, em cima do transfection em pilhas heLa de CD4.sup.+, não conferencia resistência ao superinfection do HIV sem afetar a exposição do receptor CD4. Um leukemia murine de Moloney vírus-baseou o vetor retroviral que contem um genome de F12-HIV que falta por muito tempo o repeat 3' terminal (litro) e a parte do gene do nef, expressada sob o controle de seu 5' litro, foi construída para facilitar transferência das propriedades anti-Anti-HIV de F12-HIV em pilhas humanas. O genome de F12-HIV foi introduzido em uma orientação oposta àquela da unidade murine do transcriptional do vírus do leukemia e designado o N2/F12-HIV nef.sup. - vetor do antisense. As pilhas lymphoblastoid de CEMss, as.well.as lymphocytes periféricos humanos do sangue, eram transduced com sucesso pelo retrovirus recombinant. CEMss clones expressar o F12-HIV nef.sup. - o vetor do antisense era resistente ao superinfection do HIV mesmo no multiplicity o mais elevado da infecção testado (doses infective da cultura do tecido de 10.sup.5 50% por as pilhas 10.sup.6). Nonproducer, proviruses interferindo do HIV transduced em vetores retroviral pode fornecer uma estratégia alternativa para a proteção de pilhas preliminares humanas de CD4.sup.+ da infecção de HIV.