A method of activating transcription of an RNA of interest in a cell (e.g.,
a dicot plant cell) includes the steps of: (a) providing a host cell
containing a heterologous construct, the heterologous construct comprising
an RNA virus subgenomic promoter operatively associated with a
heterologous RNA of interest, wherein the promoter does not initiate
transcription of the heterologous RNA in the absence of a corresponding
RNA virus trans-activating RNA segment, and wherein the RNA virus
trans-activating RNA segment is absent from the host cell; and then (b)
introducing a trans-activating nucleic acid segment into the host cell so
that transcription of the heterologous RNA is initiated. The
trans-activating segment may be introduced into the cell by any suitable
means, such as by infecting the cell with a virus, which virus expresses
the trans-activating RNA.
Μια μέθοδος ενεργοποιώντας μεταγραφής ενός RNA ενδιαφέροντος για ένα κύτταρο (π.χ., ένα κύτταρο φυτών dicot) περιλαμβάνει τα βήματα: (α) παρέχοντας ένα κύτταρο οικοδεσποτών που περιέχει ένα ετερόλογο κατασκεύασμα, το ετερόλογο κατασκεύασμα που περιλαμβάνει έναν subgenomic υποστηρικτή ιών RNA σύνδεσε ενεργά με ένα ετερόλογο RNA ενδιαφέροντος, όπου ο υποστηρικτής δεν αρχίζει τη μεταγραφή του ετερόλογου RNA ελλείψει ενός αντίστοιχου RNA τμήματος RNA ιών δια-ενεργοποιώντας, και όπου το δια-ενεργοποιώντας τμήμα RNA ιών RNA είναι απόν από το κύτταρο οικοδεσποτών και έπειτα (β) εισάγοντας ένα δια-ενεργοποιώντας τμήμα νουκλεϊνικού οξέος στο κύτταρο οικοδεσποτών έτσι ώστε η μεταγραφή του ετερόλογου RNA αρχίζει. Το δια-ενεργοποιώντας τμήμα μπορεί να εισαχθεί στο κύτταρο με οποιαδήποτε κατάλληλα μέσα, όπως με τη μόλυνση του κυττάρου με έναν ιό, ποιος ιός εκφράζει το δια-ενεργοποιώντας RNA.