Peanuts are a common cause of food hypersensitivity reactions. The sera of
10 patients who had atopic dermatitis and a positive double-blind
placebo-controlled food challenge to peanut were used to investigate the
major allergens of peanut. Crude Florunner extracts were fractionated by
anion-exchange chromatography using a step gradient (limit buffer, 0.05M
BisTris/1.5M NaCl). One hundred microliters of each 2.0 ml fraction was
dot-blotted onto nitrocellulose paper and IgE-binding activity assessed
using the serum pool to select allergen-containing fractions. A protein
peak (OD 280) which eluted at 10% NaCl and demonstrated intense
IgE-binding was further analyzed by two-dimensional SDS-PAGE/immunoblot
analysis. The majority of this fraction is a protein which has a molecular
weight of 17 kD and a pI of 5.2. Sequencing data from the N-terminus
revealed the following initial 9 amino acids: (*)-Q-Q-(*)-E-L-Q-D-L. Based
on IgE-binding activity and no known amino acid sequence identity to other
allergens, this allergen is designated Ara h II.
Erdnüsse sind eine allgemeine Ursache der Nahrungsmittelüberempfindlichkeitreaktionen. Die Seren von 10 Patienten, die atopic Hautentzündung und eine positive double-blind Placebo-kontrollierte Nahrungsmittelherausforderung zur Erdnuß hatten, wurden benutzt, um die Hauptallergene der Erdnuß nachzuforschen. Grobe Florunner Extrakte wurden durch Anionenaustauschchromatographie mit einer Schritsteigung fraktioniert (Begrenzung Puffer, 0.05M BisTris/1.5M NaCl). Hundert Mikroliter jedes 2.0 ml Bruches wurden auf Nitrozellulosepapier Punkt-befleckt und IgE-bindene Tätigkeit setzte mit der Serumlache, das Allergen-Enthalten der Brüche vorzuwählen fest. Eine Proteinspitze (Od 280) das bei 10% NaCl und dem demonstrierten intensiven IgE-Binden eluierte, wurde weiter durch zweidimensionale SDS-PAGE/immunoblot Analyse analysiert. Die Majorität dieses Bruches ist ein Protein, das ein Molekulargewicht kD 17 und PU von 5.2 hat. Das Der Reihe nach ordnen von von Daten vom N-N-terminus deckte die folgenden Initiale 9 Aminosäuren auf: (*)-Q-Q-(*)-E-L-Q-D-L., die auf IgE-bindener Tätigkeit und keiner bekannten Aminosäure basieren, ordnen Identität zu anderen Allergenen, dieses Allergen wird gekennzeichnet Ara h II der Reihe nach.