Methods for improving purification and quantification of platelet derived
growth factor (PDGF) proteins having structural heterogeneity are
provided. Preparation of substantially pure isoforms of these proteins is
achieved using TSK sulfopropyl cation exchange chromatography and reverse
phase high performance liquid chromatography. A reverse charged capillary
zone electrophoresis method enables quantification of substantially pure
isoforms of these proteins resulting from endoproteolytic
post-translational modifications. Compositions of the invention are
substantially purified isoforms of secreted PDGF proteins having
structural heterogeneity, more particularly purified intact,
single-clipped, and double-clipped isoforms of recombinant PDGF-BB.
Pharmaceutical compositions comprising at least one of these substantially
purified recombinant PDGF isoforms and methods for their use in promoting
wound healing are also provided.
Os métodos para melhorar o purification e a quantificação das proteínas derivadas platelet do fator do crescimento (PDGF) que têm o heterogeneity estrutural são fornecidos. A preparação de isoforms substancialmente puros destas proteínas é conseguida usando o chromatography da troca de cation do sulfopropyl de TSK e o chromatography líquido reverso de desempenho elevado da fase. Um método capilar carregado reverso do electrophoresis da zona permite a quantificação de isoforms substancialmente puros destas proteínas resultando das modificações borne-post-translational endoproteolytic. As composições da invenção são substancialmente isoforms purified das proteínas secreted de PDGF que têm o heterogeneity estrutural, purified mais particularmente intact, isoforms único-grampeados, e dobro-grampeados de PDGF-BB recombinant. As composições pharmaceutical que compreendem ao menos um destes isoforms recombinant substancialmente purified e de métodos de PDGF para seu uso em promover a ferida que healing são fornecidas também.