Several genes encoding subunits of the neuronal nicotinic acetylcholine
receptors have been cloned and regulatory elements involved in the
transcription of the .alpha.:2 and .alpha.:7- subunit genes have been
described. Yet, the detailed mechanisms governing the neuron-specific
transcription and the spatio-temporal expression-pattern of these genes
remain largely uninvestigated. The .beta.2-subunit is the most widely
expressed neuronal nicotinic receptors subunit in the nervous system. We
have studied the structural and regulatory properties of the 5' sequence
of this gene. A fragment of 1163 bp of upstream sequence is sufficient to
drive the cell-specific transcription of a reporter gene in both transient
transfection assays and in transgenic mice. Deletion analysis and
site-directed mutagenesis of this promoter reveal two negative and one
positive element. The positively acting sequence includes one functional
E-box. One of the repressor elements is located in the transcribed region
and is the NRSE/RE1 sequence already described in promoters of neuronal
genes.
Varios genes que codificaban las subunidades de los receptores nicotínicos neuronales del acetylcholine se han reproducido y los elementos reguladores implicados en la transcripción de los genes de la subunidad del alpha.:2 y del alpha.:7- se han descrito. Todavía, sigue habiendo los mecanismos detallados que gobiernan la transcripción neurona-especi'fica y el expresio'n-patro'n spatio-temporal de estos genes uninvestigated en gran parte. La beta.2-subunidad es la subunidad nicotínica neuronal lo más extensamente posible expresada de los receptores del sistema nervioso. Hemos estudiado las características estructurales y reguladoras de la secuencia 5' de este gene. Un fragmento del punto de ebullición 1163 de la secuencia por aguas arriba es suficiente conducir la transcripción ce'lula-especi'fica de un gene del reportero en ambos análisis transitorios del transfection y en ratones transgenic. El análisis de la canceladura y la mutagénesis sitio-dirigida de este promotor revelan dos elementos negativos y un positivos. La secuencia positivamente que actúa incluye una E-caja funcional. Uno de los elementos del represor se establece en la región transcrita y es la secuencia NRSE/RE1 descrita ya en los promotores de genes neuronales.
