Compositions and methods for electrochemical detection and localization of
genetic point mutations and other base-stacking perturbations within
oligonucleotide duplexes adsorbed onto electrodes and their use in
biosensing technologies are described. An intercalative, redox-active
moiety (such as an intercalator or nucleic acid-binding protein) is
adhered and/or crosslinked to immobilized DNA duplexes at different
separations from an electrode and probed electrochemically in the presence
or absence of a non-intercalative, redox-active moiety. Interruptions in
DNA-mediated electron-transfer caused by base-stacking perturbations, such
as mutations or binding of a protein to its recognition site are reflected
in a difference in electrical current, charge and/or potential.
As composições e os métodos para a deteção e localization eletroquímico de mutations genetic do ponto e outros perturbations deempilhamento dentro dos duplex do oligonucleotide adsorbed nos elétrodos e seu uso em tecnologias biosensing são descritos. Um moiety intercalative, redox-ativo (tal como um intercalator ou uma proteína ácido-ligando nucleic) é aderido e/ou crosslinked aos duplex immobilized do DNA em separações diferentes de um elétrodo e sondado eletroquìmica na presença ou na ausência de um moiety non-intercalative, redox-ativo. Os interruptions no DNA-mediado elétron-transferem causado por perturbations deempilhamento, tais como mutations ou o emperramento de uma proteína a seu local do recognition é refletido em uma diferença na corrente, na carga e/ou no potencial elétricos.