Peanuts are a common cause of food hypersensitivity reactions. The sera of
10 patients who had atopic dermatitis and a positive double-blind
placebo-controlled food challenge to peanut were used to investigate the
major allergens of peanut. Crude Florunner extracts were fractionated by
anion-exchange chromatography using a step gradient (limit buffer, 0.05M
BisTris/1.5M NaCl). A protein peak (OD 280) which eluted at 10% NaCl and
demonstrated intense IgE-binding was further analyzed by two-dimensional
SDS-PAGE/immunoblot analysis. The majority of this fraction is a protein
which has a molecular weight of 17 kD and a pI of 5.2. Sequencing data
from the N-terminus revealed the following initial 9 amino acids:
(*)-Q-Q-(*)-E-L-Q-D-L. Based on IgE-binding activity and no known amino
acid sequence identity to other allergens, this allergen is designated Ara
h II. Ara h II may be used to detect and quantify peanut allergens in
foodstuffs. Serum IgE from patients with documented peanut
hypersensitivity reactions and a peanut cDNA expression library were used
to identify clones that encode peanut allergens.
Τα φυστίκια είναι μια κοινή αιτία των αντιδράσεων υπερευαισθησίας τροφίμων. Οι οροί 10 ασθενών που είχαν την έκτοπη δερματίτιδα και μια θετική double-blind ψευδοφάρμακο-ελεγχόμενη πρόκληση τροφίμων στο φυστίκι χρησιμοποιήθηκαν για να ερευνήσουν τα σημαντικότερα αλλεργιογόνα του φυστικιού. Τα ακατέργαστα αποσπάσματα Florunner διαχωρίστηκαν σε συστατικά από anion-exchange τη χρωματογραφία χρησιμοποιώντας μια κλίση βημάτων (απομονωτής ορίου, 0.05M BisTris/1.5M NaCl). Μια πρωτεϊνική αιχμή (το OD 280) που διαχώρισε με εκχύλιση κατά 10% NaCl και κατέδειξε την έντονη ηγΕ-σύνδεση αναλύθηκε περαιτέρω από την δισδιάστατες σδς-ΣΕΛΊΔΑ/immunoblot την ανάλυση. Η πλειοψηφία αυτού του μέρους είναι μια πρωτεϊ'νη που έχει ένα μοριακό βάρος 17 kD και pI 5.2. τοποθετώντας διαδοχικά τα στοιχεία από το ν-τέρμα αποκάλυψε τα ακόλουθα αρχικά 9 αμινοξέα: (*)QQ(*)ELQDL. Με βάση την ηγΕ-δεσμευτική δραστηριότητα και καμία γνωστή ταυτότητα ακολουθίας αμινοξέος σε άλλα αλλεργιογόνα, αυτό το αλλεργιογόνο υποδεικνύεται Ara χ ΙΙ. Το Ara χ ΙΙ μπορεί να χρησιμοποιηθεί για να ανιχνεύσει και να ποσολογήσει τα αλλεργιογόνα φυστικιών στα τρόφιμα. Ο ορός IgE από τους ασθενείς με τις τεκμηριωμένες αντιδράσεις υπερευαισθησίας φυστικιών και μια βιβλιοθήκη έκφρασης φυστικιών DNA χρησιμοποιήθηκαν για να προσδιορίσουν τους κλώνους που κωδικοποιούν τα αλλεργιογόνα φυστικιών.