A method for purifying bone-derived TGF-.beta. proteins including an anion
exchange process, a cation exchange process, and a reverse phase HPLC
process, and optionally, a filtration process, a Heparin-Sepharose
process, and/or a reverse phase HPLC desalting process. The filtration
process preferably selects proteins having a nominal molecular weight
between approximately 10 kilodaltons and approximately 100 kilodaltons.
Preferably, the anion exchange process uses a strongly cationic resin
having quaternary amine functional groups. Preferably, the cation exchange
process uses a strongly anionic resin having sulfonic acid functional
groups. The TGF-.beta. proteins can be eluted from the reverse phase HPLC
column with an acetonitrile solution in combination with aqueous
trifluoracetic acid. The purification processes yield highly enriched
TGF-.beta.1 and TGF-.beta.2 proteins.
Un metodo per la purificazione delle proteine osso-derivate di TGF-.beta. compresi un processo di scambio di anioni, un processo di scambio cationico e un processo d'inversione di HPLC di fase e facoltativamente, un processo di filtrazione, un processo di Eparina-heparin-Sepharose e/o un processo d'inversione di desalificazione di HPLC di fase. Il processo di filtrazione seleziona preferibilmente le proteine che hanno un peso molecolare nominale fra circa 10 kilodaltons e circa 100 kilodaltons. Preferibilmente, il processo di scambio di anioni usa una resina fortemente cationica che ha gruppi funzionali dell'ammina quaternaria. Preferibilmente, il processo di scambio cationico usa una resina fortemente anionica che ha gruppi funzionali dell'acido solfonico. Le proteine di TGF-.beta. possono essere eluite dalla colonna d'inversione di HPLC di fase con una soluzione dell'acetonitrile congiuntamente ad acido trifluoracetic acquoso. I processi di purificazione rendono le proteine altamente arricchite TGF-.beta.1 e TGF-.beta.2.