Human hepatitis C virus (HCV) has been identified as the aetiological agent of non-A, non-B hepatitis (NANBH). HCV viruses display considerable genotypic and phenotypic heterogeneity. Thus, there is considerable need in the art for more sensitive reagents that facilitate the detection of HCV variants. The genome of hepatitis C virus (HCV) consists of seven functional regions: the core, E1, E2/NS1, NS2, NS3, NS4, and NS5 regions. An attempt was made to improve the sensitivity of anti-HCV assays by developing multiple copy epitope fusion antigens (MEFAs) which incorporate the major immunodominant epitopes from the functional regions of the HCV genome. These MEFAs are encompassed by the following generic structural formula: (A).sub.x --(B).sub.y --(C).sub.z. This formula represents a linear amino acid sequence comprising multiple copies of one HCV epitope (A) linked to multiple copies of another HCV epitope (B) which in turn is linked to multiple copies of yet another HCV epitope (C). Expression vectors carrying nucleic acid sequences comprising MEFA antigens carrying multiple copies of epitopes derived from the viral core, E1, E2, NS3, NS4, and NS5 regions were prepared. The resultant MEFA antigens were expressed, purified, and employed in suitable immunoassays for the detection of HCV-specific antisera. These antigens provide excellent sensitivity and specificity for the detection of HCV.

Ο ανθρώπινος ιός ηπατίτιδας γ (HCV) έχει προσδιοριστεί ως αιτιολογικός πράκτορας non-A, ηπατίτιδα μη-β (NANBH). Οι ιοί HCV επιδεικνύουν την ιδιαίτερη genotypic και φαινοτυπική ετερογένεια. Κατά συνέπεια, υπάρχει ιδιαίτερη ανάγκη στην τέχνη για τα πιό ευαίσθητα αντιδραστήρια που διευκολύνουν την ανίχνευση των παραλλαγών HCV. Το γονιδίωμα του ιού ηπατίτιδας γ (HCV) αποτελείται από επτά λειτουργικές περιοχές: ο πυρήνας, E1, το E2/NS1, NS2, NS3, NS4, και NS5 οι περιοχές. Μια προσπάθεια έγινε να βελτιώσει την ευαισθησία των δοκιμών αντι- hcv με την ανάπτυξη των πολλαπλάσιων αντιγόνων τήξης επιτόπου αντιγράφων (MEFAs) που ενσωματώνουν τα σημαντικότερα immunodominant επίτοπα από τις λειτουργικές περιοχές του γονιδιώματος HCV. Αυτά τα MEFAs καλύπτονται από τον ακόλουθο γενικό δομικό τύπο: (A).sub.x -- (B).sub.y -- (C).sub.z. Αυτός ο τύπος αντιπροσωπεύει μια γραμμική ακολουθία αμινοξέος περιλαμβάνοντας τα πολλαπλάσια αντίγραφα ενός HCV επιτόπου (A) που συνδέεται με τα πολλαπλάσια αντίγραφα ενός άλλου HCV επιτόπου (B) που συνδέεται στη συνέχεια με τα πολλαπλάσια αντίγραφα ακόμα ενός HCV επιτόπου (C). Τα διανύσματα έκφρασης που φέρνουν τις ακολουθίες νουκλεϊνικού οξέος που περιλαμβάνουν τα αντιγόνα MEFA που φέρνουν τα πολλαπλάσια αντίγραφα των επιτόπων που προήλθαν από τον προερχόμενους από ιό πυρήνα, E1, E2, NS3, NS4, και NS5 τις περιοχές προετοιμάστηκαν. Τα επακόλουθα αντιγόνα MEFA εκφράστηκαν, καθαρίστηκαν, και χρησιμοποιήθηκαν κατάλληλα immunoassays για την ανίχνευση των χθβ-συγκεκριμένων αντιορών. Αυτά τα αντιγόνα παρέχουν την άριστες ευαισθησία και την ιδιομορφία για την ανίχνευση HCV.