The invention provides a method of making and secreting a non-secreted
protein. The method includes expressing the protein from a nucleic acid
construct which includes: (a) a mammary epithelial specific promoter; (b)
a milk protein specific signal sequence which can direct the secretion of
a protein; (c) optionally, a sequence which encodes a sufficient portion
of the amino terminal coding region of a secreted protein to allow
secretion in the milk of a transgenic mammal, of the non-secreted protein;
and (d) a sequence which encodes a non-secreted protein, wherein elements
(a), (b), optionally (c), and (d) are preferably operatively linked in the
order recited. Both glutamic acid decarboxylase (GAD) and myelin basic
protein (MBP), which are cytoplasmic proteins, have been produced by the
methods of the present invention. The invention also provides methods for
treating diabetes and multiple sclerosis using proteins produced by the
methods of the present invention.
L'invenzione fornisce un metodo di fabbricazione e la secrezione della proteina non-secernuta. Il metodo include esprimere la proteina da una costruzione dell'acido nucleico che include: (a) un promotore specifico epiteliale mammario; (b) una sequenza specifica del segnale della proteina del latte che può dirigere la secrezione di una proteina; (c) facoltativamente, una sequenza che mette una parte in codice sufficiente della regione terminale amminica di codificazione di una proteina secernuta per permettere la secrezione nel latte di un mammifero transgenic, della proteina non-secernuta; e (d) una sequenza che mette una proteina in codice non-secernuta, in cui gli elementi (a), (b), facoltativamente (c) e (d) sono collegati preferibilmente attivamente nell'ordine recited. Sia la decarbossilasi dell'acido glutammico (GAD) che la proteina di base di myelin (MBP), che sono proteine citoplasmiche, sono state prodotte con i metodi di presente invenzione. L'invenzione inoltre fornisce i metodi per trattare il diabete e la sclerosi a placche usando le proteine prodotte con i metodi di presente invenzione.
