Methods to find optimal integration sites within a plant genome are
provided. More particularly, a plant is transformed with a target site
having an expression cassette comprising a nucleotide sequence operably
linked to a promoter active in the plant. The target site is flanked by
non-identical recombination sites, Transformed protoplast, tissues, or
whole plants can be tested to determine the levels of activity of the
inserted gene, By comparison of cellular activities of the gene in
different insertion sites, preferred integration sites may be found
wherein the gene is expressed at high or acceptable levels. These plants
can then be utilized with subsequent retargeting techniques to replace the
nucleotide sequence with other genes or nucleotide sequences of interest
contained in a transfer cassette.
Die Methoden, zum der optimalen Integration Aufstellungsorte innerhalb eines Betriebsgenoms zu finden werden zur Verfügung gestellt. Besonders, wird ein Betrieb mit einem Zielaufstellungsort umgewandelt, der eine Ausdruck Kassette hat, eine Nukleotidreihenfolge zu enthalten, die operably mit einem Förderer verbunden wird, der im Betrieb aktiv ist. Der Zielaufstellungsort wird durch nicht identische Rekombinationaufstellungsorte, umgewandelter Protoplast, Gewebe angegrenzt, oder vollständige Betriebe können, um die Niveaus der Tätigkeit des eingesetzten Gens festzustellen, durch Vergleich der zellularen Tätigkeiten des Gens in den unterschiedlichen Einfügungaufstellungsorten geprüft werden, bevorzugten Integration Aufstellungsorte können gefunden werden, worin das Gen auf den hohen oder annehmbaren Niveaus ausgedrückt wird. Diese Betriebe können mit folgenden retargeting Techniken dann verwendet werden, um die Nukleotidreihenfolge mit anderen Gen- oder Nukleotidreihenfolgen des Interesses zu ersetzen enthalten in einer Übergangskassette.