A method for producing a stable polymerized hemoglobin blood-substitute
from blood. The method of this invention includes mixing blood with an
anticoagulant to form a blood solution, washing the red blood cells in the
blood solution and then separating the washed red blood cells from the
white blood cells. This method also includes disrupting the red blood
cells to release hemoglobin and form a hemoglobin solution, which is then
treated by high performance liquid chromatography to form a hemoglobin
eluate. The hemoglobin eluate is then deoxygenated, contacted with a first
sulfhydryl compound to form an oxidation-stabilized deoxygenated
hemoglobin solution, and mixed with a cross-linking agent to form a
polymerization reaction mixture, which is then polymerized. The
polymerized hemoglobin solution is then diafiltered with a physiologic
solution and with a sulfhydryl compound, whereby the polymerized
hemoglobin solution is made physiologically acceptable, and whereby the
sulfhydryl compound scavenges oxygen, to form a stable polymerized
hemoglobin blood-substitute.
Un metodo per produrre un'emoglobina polimerizzata stabile anima-sostituisce da anima. Il metodo di questa invenzione include l'anima di miscelazione con un anticoagulante per formare una soluzione di anima, lavante le cellule di anima rosse nella soluzione di anima ed allora separante le cellule di anima rosse lavate dalle cellule di anima bianche. Questo metodo inoltre include l'interruzione delle cellule di anima rosse per liberare l'emoglobina e formare una soluzione dell'emoglobina, che allora è trattata da cromatografia a fase mobile liquida di rendimento elevato per formare un eluito dell'emoglobina. L'eluito dell'emoglobina è allora deoxygenated, messo in contatto con con un primo residuo solfidrilico per formare ossidazione-stabilizzato deoxygenated la soluzione dell'emoglobina ed ha mescolato con un agente di cross-linking per formare una miscela di reazione di polimerizzazione, che allora è polimerizzata. La soluzione polimerizzata dell'emoglobina è allora diafiltered con una soluzione fisiologica e con un residuo solfidrilico, per cui la soluzione polimerizzata dell'emoglobina è resa fisiologicamente accettabile e per cui il residuo solfidrilico pulisce l'ossigeno, per formare un'emoglobina polimerizzata stabile anima-sostituisca.