The invention concerns a method for the modification, cloning and
amplification of cDNAs which are complete at their 5' end which is
essentially characterized in that the first strand cDNA synthesis is
carried out in the presence of manganese.sup.2+ ions or manganese.sup.2+
is added as an additive at a later time. The CAP structure at the 5' end
of the reversely transcribed mRNA triggers the attachment of
deoxy-cytosines to the 3' end of the cDNA with high efficiency. In a
preferred embodiment a controlled ribonucleotide tailing is carried out
with the aid of terminal transferase following the first strand cDNA
synthesis.
A invenção concerne um método para a modificação, o cloning e o amplification de DNAS quais estão completas em sua extremidade 5' qual é caracterizado essencialmente que a primeira síntese do DNA da costa está realizada na presença de íons de manganese.sup.2+ ou manganese.sup.2+ está adicionado enquanto um aditivo em uma estadia mais atrasada. A estrutura do TAMPÃO no fim 5' do mRNA reversa transcrito provoca o acessório dos deoxy-cytosines à extremidade 3' do DNA com eficiência elevada. Em uma incorporação preferida uma pedra saliente controlada do ribonucleotide é realizada com o dae (dispositivo automático de entrada) do transferase terminal que segue a primeira síntese do DNA da costa.