The invention provides a continuous flow apparatus and method for purifying
charged substances from solutions or suspensions by isoelectric focusing
on an industrial scale.
The apparatus comprises a separating chamber, a pair of vertical electrodes
(9) located at the extremes of the apparatus, an anion- or a
cation-selective membrane (10) located near each of the electrodes (9) for
separating electrode spaces from a central part of the apparatus, one or
more outflow ports (12) for separating liquid fractions at the upper part
of the chamber, two secondary outflow ports (11) being provided in the
upper part of each of the electrode spaces, one or more vertical wall(s)
(6) between each of said outflow ports partitioning the chamber at least
at the height of said outflow ports (11,12), and a plurality of vertical
permeable partition walls (13) to enable a convection-free upward flow.
The apparatus invention does not require additional amphoteric buffering
solutions to establish a suitable pH gradient, and can be used for
purification of polynucleotides, amino acids, peptides, proteins, organic
solvents and beverages.
L'invention fournit un matériel et une méthode continus d'écoulement pour épurer les substances chargées des solutions ou les suspensions par la mise au point isoélectrique sur une échelle industrielle. L'appareil comporte une cuvette de séparation, une paire des électrodes verticales (9) situées aux extrémités de l'appareil, anion ou une membrane cation-sélective (10) plac près de chacune des électrodes (9) pour séparer les espaces d'électrode d'une pièce centrale de l'appareil, un ou plusieurs ports de sortie (12) pour séparer les fractions liquides à la partie supérieure de la chambre, deux ports secondaires de sortie (11) étant fournis dans la partie supérieure de chacun des espaces d'électrode, un ou plusieurs wall(s) vertical (6) entre chacun de lesdits ports de sortie divisant la chambre au moins à la taille de lesdits ports de sortie (11.12), et une pluralité de cloisons de séparation perméables verticales (13) pour permettre un écoulement ascendant convection-libre. L'invention d'appareil n'exige pas des solutions amphotères additionnelles d'amortissement d'établir un gradient approprié de pH, et peut être employée pour la purification des polynucleotides, des acides aminés, des peptides, des protéines, des dissolvants organiques et des boissons.