A method for the direct analysis of analyte in keratinized structures,
e.g., hair, fingernails and toenails, which comprises preparing a mixture
containing a low redox potential compound such as dithiothreitol or
dithioerythritol, an enzyme suitable for the degradation of the keratin
structure and a sample of the keratin structure; permitting the enzyme to
at least substantially degrade the sample of keratin structure, filtering
the digest solution to remove substances which may interfere with ligand
based analytical methods and subjecting the filtered digest solution to
analysis to determine the identity and amount of analyte in the keratin
substance sample. To accelerate the method, cupric sulfate may be added to
the mixture after degradation of the keratin sample. The enzyme may be a
peptidase, endopeptidase or proteinase, with papain, chymopapain, and
proteinase K being preferred for use in the invention. The filter
preferably is of the centrifugal type, characterized by a highly inert and
low binding, regeneraged de-acetylated cellulose membrane and capable of
removing proteins and peptides having molecular weights in the preferred
range of 10,000 to 30,000 or greater.
Um método para a análise direta do analyte keratinized dentro estruturas, por exemplo, o cabelo, as unhas e os toenails, que compreende preparar uma mistura que contem um composto baixo do potencial redox tal como o dithiothreitol ou o dithioerythritol, um enzyme apropriado para a degradação da estrutura do keratin e uma amostra da estrutura do keratin; permitindo o enzyme degradar ao menos substancialmente a amostra da estrutura do keratin, filtrando a solução do sumário para remover as substâncias que podem interferir com os métodos analíticos baseados ligand e sujeitar a solução filtrada do sumário à análise determinar a identidade e a quantidade de analyte na amostra da substância do keratin. Acelere o método, sulfate cupric pode ser adicionado à mistura após a degradação da amostra do keratin. O enzyme pode ser um peptidase, um endopeptidase ou um proteinase, com papain, chymopapain, e proteinase K que está sendo preferido para o uso na invenção. O filtro é preferivelmente do tipo centrífugo, caracterizado por um altamente inerte e o emperramento do ponto baixo, regeneraged a membrana de-de-acetylated da celulose e capaz de remover as proteínas e os peptides que têm pesos molecular na escala preferida de 10.000 a de 30.000 ou de mais grande.