Expression systems are disclosed for the direct expression of peptide
products into the culture media where genetically engineered host cells
are grown. High yield was achieved with novel vectors, a special selection
of hosts, and/or fermentation processes which include careful control of
cell growth rate, and use of an inducer during growth phase. Special
vectors are provided which include control regions having multiple
promoters linked operably with coding regions encoding a signal peptide
upstream from a coding region encoding the peptide of interest. Multiple
transcription cassettes are also used to increase yield. The production of
amidated peptides using the expression systems is also disclosed.
Τα συστήματα έκφρασης αποκαλύπτονται για την άμεση έκφραση των προϊόντων πεπτιδίων στα μέσα πολιτισμού όπου τα γενετικά κατασκευασμένα κύτταρα οικοδεσποτών αυξάνονται. Η υψηλή παραγωγή επιτεύχθηκε με τα νέα διανύσματα, μια ειδική επιλογή των οικοδεσποτών, ή/και των διαδικασιών ζύμωσης που περιλαμβάνει τον προσεκτικό έλεγχο του ποσοστού αύξησης κυττάρων, και τη χρήση ενός επαγωγέα κατά τη διάρκεια της φάσης αύξησης. Τα ειδικά διανύσματα παρέχονται που περιλαμβάνουν τις περιοχές ελέγχου που έχουν τους πολλαπλάσιους υποστηρικτές συνδεμένων operably με τις περιοχές κωδικοποίησης που κωδικοποιούν ένα πεπτίδιο σημάτων προς τα πάνω από μια περιοχή κωδικοποίησης που κωδικοποιεί το πεπτίδιο ενδιαφέροντος. Οι πολλαπλάσιες κασέτες μεταγραφής χρησιμοποιούνται επίσης για να αυξήσουν την παραγωγή. Η παραγωγή των αμιδούχων πεπτιδίων που χρησιμοποιούν τα συστήματα έκφρασης αποκαλύπτεται επίσης.