Methods are provided for purifying peptides and proteins by incorporating the peptide or protein into a diketopiperazine or competitive complexing agent to facilitate removal one or more impurities, i.e. undesirable components, from the peptide or protein. In a preferred embodiment, a peptide, such as insulin, containing one or more impurities, e.g., zinc ions, is entrapped in diketopiperazine to form a precipitate of peptide/diketopiperazine/impurity, which is then washed with a solvent for the impurity to be removed, which is a nonsolvent for the diketopiperazine and a nonsolvent for the peptide. Formulations and methods also are provided for the improved transport of active agents across biological membranes, resulting for example in a rapid increase in blood agent concentration. The formulations include microparticles formed of (i) the active agent, which may be charged or neutral, and (ii) a transport enhancer that masks the charge of the agent and/or that forms hydrogen bonds with the target biological membrane in order to facilitate transport. In a preferred embodiment, insulin is administered via the pulmonary delivery of microparticles comprising fumaryl diketopiperazine and insulin in its biologically active form. The charge on the insulin molecule is masked by hydrogen bonding it to the diketopiperazine, thereby enabling the insulin to pass through the target membrane. This method of delivering insulin results in a rapid increase in blood insulin concentration that is comparable to the increase resulting from intravenous delivery.

De methodes worden verstrekt voor het zuiveren van peptides en proteïnen door peptide of de proteïne in diketopiperazine op te nemen of concurrerende complicerende agent om verwijdering één of meerdere onzuiverheden, d.w.z. ongewenste componenten, van peptide of de proteïne te vergemakkelijken. In een aangewezen belichaming, is peptide, zoals insuline, die één of meerdere onzuiverheden bevat, b.v., zinkionen, gevangen in diketopiperazine om een precipitaat van peptide/diketopiperazine/impurity te vormen, dat dan met een oplosmiddel voor de te verwijderen onzuiverheid wordt gewassen, die nonsolvent voor diketopiperazine en nonsolvent voor peptide is. De formuleringen en de methodes worden ook verstrekt voor het betere vervoer van actieve agenten over biologische membranen, resulterend bijvoorbeeld in een snelle verhoging van de concentratie van de bloedagent. De formuleringen omvatten microparticles die van (i) de actieve agent wordt gevormd, die kunnen worden geladen of neutraal, en (ii) een vervoerversterker die de last van de agent maskeert en/of die waterstofbanden met het doel biologische membraan vormt om vervoer te vergemakkelijken. In een aangewezen belichaming, wordt de insuline beheerd via de longlevering van microparticles bestaand fumaryl uit diketopiperazine en insuline in zijn biologisch actieve vorm. De last op de insulinemolecule wordt door waterstof gemaskeerd die het plakt op diketopiperazine, daardoor toelatend de insuline om door het doelmembraan over te gaan. Deze methode om insuline te leveren resulteert in een snelle verhoging van de concentratie van de bloedinsuline die met de verhoging die uit intraveneuze levering voortvloeit vergelijkbaar is.