The present invention discloses a method for the measurement of hydride
using a chemiluminescent compound. The preferred chemiluminescent molecule
is an acridinium compound. The source of hydride for the reduction of
acridinium compound may be of chemical or biochemical origin, or the
result of enzymatic catalysis. The chemical source of hydride, for
example, might be metal hydrides, such as NaBH.sub.4. A biochemical source
of hydride might be that derived from NADH, or NADPH, while an enzymatic
source would be the class of oxidoreductases termed dehydrogenases which
convert NADH or NADPH from NAD or NADP.
There are numerous potential applications for acridinium compounds as
chemiluminescent indicators of hydride. Any applied tests or diagnostic
assays, in which hydride is either present at the onset of or generated
through the course of a reaction, would benefit from the present
invention. Such tests, which could encompass many different formats as
discussed below in detail, may involve the quantitation or detection of
metal hydrides, or enzyme cofactors such as NADH, NADPH, FMNH.sub.2, or
FADH.sub.2. Of particular importance, are those diagnostic assays which
might use dehydrogenases as reagents, indicators, diagnostic markers or as
labels. Ethanol, for example, might be detected with acridinium ester
chemiluminescence through the reaction of alcohol dehydrogenase on
ethanol, said reaction producing NADH. As a label, dehydrogenase might be
used in an ELISA for the detection of a specific analyte with acridinium
ester providing the signaling response. Nucleic acid assays using
dehydrogenase as a label are also envisioned. Assays for the detection of
clinically relevant dehydrogenases such as elevated glutamate
dehydrogenase as an indicator of hepatocellular damage might also be
developed.
Die anwesende Erfindung gibt eine Methode für das Maß des Hydrids mit einem chemiluminescent Mittel frei. Das bevorzugte chemiluminescent Molekül ist ein acridinium Mittel. Die Quelle des Hydrids für die Verkleinerung des acridinium Mittels kann vom chemischen oder biochemischen Ursprung sein oder das Resultat der enzymatischen Katalyse. Die chemische Quelle des Hydrids z.B. konnte Metallhydride, wie NaBH.sub.4 sein. Eine biochemische Quelle des Hydrids konnte die, die von NADH abgeleitet wurden, oder NADPH sein, während eine enzymatische Quelle die Kategorie der Oxydoreduktasen sein würde, die Dehydrogenasen benannt wurden, die NADH oder NADPH von NAD oder von NADP umwandeln. Es gibt zahlreiche mögliche Anwendungen für acridinium Mittel als chemiluminescent Anzeigen des Hydrids. Alle angewandten Tests oder Diagnoseproben, in denen Hydrid jedes Geschenk am Angriff von oder erzeugt durch den Kurs einer Reaktion ist, würden von der anwesenden Erfindung profitieren. Solche Tests, die viele unterschiedliche Formate umgeben konnten, wie unten im Detail besprochen, können die quantitative Bestimmung oder die Abfragung der Metallhydride oder der Enzymadjunkten wie NADH, NADPH, FMNH.sub.2 oder FADH.sub.2 mit einbeziehen. Von der besonderen Bedeutung sind jene Diagnoseproben, die Dehydrogenasen als Reagenzien, Anzeigen, Diagnosemarkierungen benutzen konnten oder als Aufkleber. Äthanol z.B. konnte mit acridinium Esterchemolumineszenz durch die Reaktion der Spiritusdehydrogenase auf Äthanol, besagte Reaktion ermittelt werden, NADH produzierend. Als Aufkleber konnte Dehydrogenase in einem ELISA für die Abfragung eines spezifischen Parameters mit dem acridinium Ester benutzt werden, der die signalisierende Antwort bereitstellt. Nukleinsäure prüft mit Dehydrogenase, während ein Aufkleber auch vorgestellt werden. Proben für die Abfragung der klinisch relevanten Dehydrogenasen wie erhöhte Glutamatdehydrogenase als Anzeige der hepatocellular Beschädigung konnten auch entwickelt werden.