This invention relates to improved methods for producing nonsegmented, negative-sense, single-stranded RNA viruses of the Order designated Mononegavirales virus, including embodiments relating to methods of producing such viruses as attenuated and/or infectious viruses, such as Measles virus (MV) and respiratory syncytial virus (RSV). One method for producing a recombinant virus from the Order Mononegavirales comprises (a) in at least one host cell, conducting transfection of a rescue composition which comprises (i) a transcription vector comprising an isolated nucleic acid molecule which comprises polynucleotide sequence encoding a genome or antigenome of a nonsegmented, negative-sense, single stranded RNA virus of the Order Mononegavirales and (ii) at least one expression vector which comprises at least one isolated nucleic acid molecule encoding the trans-acting proteins necessary for encapsidation, transcription and replication; in a host cell under conditions sufficient to permit the co-expression of these vectors and the production of the recombinant virus; (b) heating the transfected rescue composition to an effective heat shock temperature under conditions sufficient to increase the recovery of the recombinant virus; and optionally, (c) harvesting the resulting recombinant virus.

Esta invenção relaciona-se aos métodos melhorados para produzir nonsegmented, negativo-deteta-se, vírus único-encalhados do RNA da ordem designada vírus de Mononegavirales, including as incorporações que relacionam-se aos métodos de produzir vírus como vírus atenuados e/ou infectious, tais como o vírus do sarampo (MV) e o vírus syncytial respiratory (RSV). Um método para produzir um vírus recombinant da ordem Mononegavirales compreende (a) ao menos em uma pilha de anfitrião, conduzindo o transfection de uma composição do salvamento que compreenda (i) um vetor da transcrição que compreende uma molécula isolada do ácido nucleic que compreenda a seqüência do polynucleotide que codifica um genome ou um antigenome de um nonsegmented, negativo-detete, único vírus encalhado do RNA da ordem Mononegavirales e (ii) ao menos um vetor da expressão que compreende ao menos uma molécula isolada do ácido nucleic que codifica as proteínas transacionando necessárias para o encapsidation, a transcrição e o replication; em uma pilha de anfitrião sob as circunstâncias suficientes permitir a co-expressão destes vetores e a produção do vírus recombinant; (b) aquecer-se transfected a composição do salvamento a uma temperatura eficaz de choque do calor sob as circunstâncias suficientes aumentar a recuperação do vírus recombinant; e opcionalmente, (c) colhendo o vírus recombinant resultante.