An apparatus for screening for translocation of a first protein of interest
in vivo in a plurality of cells comprises (a) a thin unitary total
internal reflection member having a surface portion, (b) a plurality cell
contacted to said surface portion by the plasma membrane of said cell,
said cell containing said first protein of interest, the protein of
interest having a fluorescent group conjugated thereto; (c) a light source
operatively associated with the total internal reflection member and
positioned for directing a source light into the member to produce an
evanescent field adjacent the surface portion, with the evanescent field
extending into a first portion of the cell adjacent the plasma membrane,
the evanescent field being weaker in a second portion of the cell, the
fluorescent group emitting light when in the first portion of the cell and
emitting less light when in the second portion of the cell; (d) coupling
means for coupling the light source to the thin unitary total internal
reflection member and illuminate at least 10 square millimeters of the
surface portion; and (e) a light detector operatively associated with the
total internal reflection member and configured to detect emitted light
from the cells, whereby the emission of more or less light from the cell
indicates the translocation of the protein between the first and second
portions of the cell.
Un aparato para defender para el desplazamiento de una primera proteína del interés in vivo en una pluralidad de células abarca (a) a miembro interno total unitario fino de la reflexión que tiene una porción superficial, (b) una célula entrada en contacto con a la porción superficial dicha por la membrana del plasma de la célula dicha, célula dicha de la pluralidad que contiene la primera proteína dicha del interés, la proteína del interés que hace un grupo fluorescente conjugar además; (c) una fuente de luz asociada operativo al miembro interno total de la reflexión y colocada para ordenar una luz de la fuente en el miembro para producir un campo evanescente adyacente la porción superficial, con el campo evanescente ampliando en una primera porción de la célula adyacente la membrana del plasma, el campo evanescente que es más débil en una segunda porción de la célula, el grupo fluorescente que emite la luz cuando en la primera porción de la célula y que emite menos luz cuando en la segunda porción de la célula; (d) el acoplador significa para juntar la fuente de luz al miembro interno total unitario fino de la reflexión e ilumina por lo menos 10 milímetros cuadrados de la porción superficial; y (e) un detector ligero asociado operativo al miembro interno total de la reflexión y configurado para detectar emitió la luz de las células, por el que la emisión más o de menos luz de la célula indique el desplazamiento de la proteína entre las primeras y segundas porciones de la célula.
