A competitive assay for the concentration of a cyclic nucleotide such as
cyclic adenosine monophosphate combines, in a reaction chamber provided
with a capture antibody, an antibody for the cAMP or other cyclic
nucleotide, the sample to be assayed and a conjugate of cAMP and alkaline
phosphatase. The mixture is incubated and washed, and after washing, a
1,2-dioxetane which is caused to decompose when contacted by the alkaline
phosphatase of said conjugate is added. The light emission caused by
decomposition is measured, with the strength of the signal being inversely
related to the concentration of the cyclic nucleotide. Optionally, an
enhancement agent in the form of a polymeric onium salt may be added, to
further enhance the light emission.
Une analyse concurrentielle pour la concentration d'un nucléotide cyclique tel que le monophosphate d'adénosine cyclique combine, dans une chambre de réaction équipée d'anticorps de capture, d'anticorps pour l'ampère ou tout autre nucléotide cyclique, d'échantillon à analyser et de conjugé d'ampère et de phosphatase alkaline. Le mélange est incubé et lavé, et après lavage, un 1,2-dioxetane qui est causé pour se décomposer une fois entré en contact par la phosphatase alkaline de ledit conjugé est ajouté. L'émission légère provoquée par décomposition est mesurée, avec la force du signal étant inversement lié à la concentration du nucléotide cyclique. Sur option, un agent de perfectionnement sous forme de sel polymère d'onium peut être ajouté, pour augmenter plus loin l'émission légère.