The present invention concerns a method for the quantification of a target
nucleic acid in a sample comprising the following steps: (i) determination
of the amplification efficiency of the target nucleic acid under defined
amplification conditions, (ii) amplification of the target nucleic acid
contained in the sample under the same defined reaction conditions, (iii)
measuring the amplification in real-time, (iv) quantification of the
original amount of target nucleic acid in the sample by correction of the
original amount derived from step (iii) with the aid of the determined
amplification efficiency. The efficiency correction of PCR reactions
according to the invention for the quantification of nucleic acids can be
used for absolute quantification with the aid of an external or internal
standard as well as for relative quantification compared to the expression
of housekeeping genes.
De onderhavige uitvinding betreft een methode voor de getalsmatige weergave van een doel nucleic zuur in een steekproef bestaand uit de volgende stappen: (i) bepaling van de versterkingsefficiency van het doel nucleic zuur in de bepaalde versterkingsomstandigheden, (ii) versterking van het doel nucleic zuur in de steekproef in de zelfde bepaalde reactieomstandigheden, (iii) metend de versterking in real time, (iv) getalsmatige weergave van de originele hoeveelheid doel nucleic zuur in de steekproef door correctie van het originele bedrag dat uit stap (iii) met de hulp van de bepaalde versterkingsefficiency wordt afgeleid. De efficiencycorrectie van PCR reacties volgens de uitvinding voor de getalsmatige weergave van nucleic zuren kan voor absolute getalsmatige weergave met de hulp van een externe of interne norm evenals voor relatieve getalsmatige weergave worden gebruikt in vergelijking met de uitdrukking van huishoudengenen.
