Mismatch Repair Detection (MRD), a novel method for DNA-variation
detection, utilizes bacteria to detect mismatches by a change in
expression of a marker gene. DNA fragments to be screened for variation
are cloned into two MRD plasmids, and bacteria are transformed with
heteroduplexes of these constructs. Resulting colonies express the marker
gene in the absence of a mismatch, and lack expression in the presence of
a mismatch. MRD is capable of detecting a single mismatch within 10 kb of
DNA. In addition, MRD can analyze many fragments simultaneously, offering
a powerful method for high-throughput genotyping and mutation detection.
Η ανίχνευση επισκευής κακού συνδυασμού (MRD), μια νέα μέθοδος για την ανίχνευση DNA-PARALLAGI'S, χρησιμοποιεί τα βακτηρίδια για να ανιχνεύσει τους κακούς συνδυασμούς από μια αλλαγή στην έκφραση ενός γονιδίου δεικτών. Τα τεμάχια DNA που καλύπτονται για την παραλλαγή κλωνοποιούνται σε δύο πλασμίδια MRD, και τα βακτηρίδια μετασχηματίζονται με τα ετερόδιπλα μόρια αυτών των κατασκευασμάτων. Οι προκύπτουσες αποικίες εκφράζουν το γονίδιο δεικτών ελλείψει ενός κακού συνδυασμού, και την έκφραση έλλειψης παρουσία ενός κακού συνδυασμού. MRD είναι σε θέση έναν ενιαίο κακό συνδυασμό μέσα σε 10 KB από το DNA. Επιπλέον, MRD μπορεί να αναλύσει πολλά τεμάχια ταυτόχρονα, που προσφέρουν μια ισχυρή μέθοδο για υψηλός-ρυθμοαπόδοσης και την ανίχνευση μεταλλαγής.
