This invention provides a method of generating a subtracted cDNA library of
a cell comprising: a) generating a cDNA library of the cell; b) isolating
double-stranded DNAs from the cDNA library; c) releasing the
double-stranded cDNA inserts from the double-stranded DNAs; d) denaturing
the isolated double-stranded cDNA inserts; e) hybridizing the denatured
double-stranded cDNA inserts with a labelled single-stranded nucleic acid
molecules which are to be subtracted from the cDNA library; and f)
separating the hybridized labeled single-stranded nucleic acid molecule
from the double-stranded cDNA inserts, thereby generating a subtracted
cDNA library of a cell. This invention also provides different uses of the
subtracted library.
Αυτή η εφεύρεση παρέχει μια μέθοδο μια αφαιρεμένη βιβλιοθήκη DNA ενός κυττάρου περιλαμβάνοντας: α) παραγωγή μιας βιβλιοθήκης DNA του κυττάρου β) απομόνωση double-stranded DNAs από τη βιβλιοθήκη DNA γ) απελευθέρωση των double-stranded ενθέτων DNA από το double-stranded DNAs Δ) μετουσίωση των απομονωμένων double-stranded ενθέτων DNA ε) υβριδιοποιώντας τα μετουσιωμένα double-stranded ένθετα DNA με μόρια ενός τα επονομαζόμενα single-stranded νουκλεϊνικού οξέος που πρόκειται να αφαιρεθούν από τη βιβλιοθήκη DNA και φ) χωρίζοντας το υβριδοποιημένο επονομαζόμενο single-stranded μόριο νουκλεϊνικού οξέος από τα double-stranded ένθετα DNA, με αυτόν τον τρόπο παράγοντας μια αφαιρεμένη βιβλιοθήκη DNA ενός κυττάρου. Αυτή η εφεύρεση παρέχει επίσης τις διαφορετικές χρήσεις της αφαιρεμένης βιβλιοθήκης.
