Recombinant fragments of Factor C are disclosed. These proteins and
peptides show great potency in recognizing, binding to, neutralizing and
removing endotoxin. These molecules can thus be used for anti-microbial,
anti-endotoxin, and anti-sepsis therapy. SSCrFCES is a 38 kDa protein
representing the LPS-binding domain of Factor C. The ability of SSCrFCES
to bind lipid A was analyzed using an ELISA-based assay as well as surface
plasmon resonance. Surface plasmon resonance similarly carried out for
SSCrFC-sushi-1,2,3-GFP, SSCrFC-sushi-1GFP, and SSCrFC-sushi-3GFP confirmed
their superior affinity for endotoxin. The 50% endotoxin-neutralizing
concentration of SSCrFCES against 200 EU of endotoxin is 0.069 .mu.M,
suggesting that SSCrFCES is an effective inhibitor of LAL coagulation
cascade. Although partially attenuated by human serum, as low as 1 .mu.M
of SSCrFCES inhibits the LPS-induced secretion of hTNF-.alpha. and hIL-8
by THP-1 and human pheripheral blood mononuclear cells with a potency more
superior than polymyxin B. SSCrFCES is non-cytotoxic, with a clearance
rate of 4.7 ml/minute. The LD.sub.90 of SSCrFCES for LPS lethality in mice
is achieved at 2 .mu.M. These results demonstrate the
endotoxin-neutralizing capability of SSCrFCES in vitro and in vivo, as
well as its potential for use in the treatment of endotoxin-induced septic
shock. Also embodied in this application is the use of the sushi peptides
and their mutant derivatives as potent antimicrobials. Further embodied in
this application is the use of sushi peptides or sushi recombinant
proteins to remove endotoxin from liquids.
Recombinant Fragmente von Faktor C werden freigegeben. Diese Proteine und Peptide zeigen große Kraft im Erkennen, im Binden zu, im Neutralisieren und im Entfernen des Endotoxins. Diese Moleküle können für antibiotisches, Anti-Endotoxin und anti-sepsis Therapie folglich benutzt werden. SSCrFCES ist ein kDa 38 Protein, welches das Langspielplatte-bindene Gebiet von Faktor C darstellt. Die Fähigkeit von SSCrFCES, Lipid A zu binden wurde mit einer ELISA-gegründeten Probe sowie Oberflächenplasmonresonanz analysiert. Die Oberflächenplasmonresonanz, die ähnlich für SSCrFC-sushi-1,2,3-GFP, SSCrFC-Sushi-1GFP und SSCrFC-sushi-3GFP durchgeführt wurde, bestätigte ihre überlegene Affinität für Endotoxin. Die 50% Endotoxin-neutralisierende Konzentration von SSCrFCES gegen EU 200 des Endotoxins ist 0.069 mu.M und vorschlägt, daß SSCrFCES ein wirkungsvolles Hemmnis der LAL Koagulationkaskade ist. Obgleich teilweise so niedrig vermindert durch menschliches Serum, wie 1 mu.M SSCrFCES die Langspielplatte-verursachte Absonderung von hTNF-.alpha. und von hIL-8 durch THP-1 und die einkernigen Zellen des menschlichen pheripheral Bluts mit einer Kraft hemmt, die überlegener ist, als polymyxin B. SSCrFCES nicht-cytotoxisch ist, mit einer Abstand Rate von 4.7 ml/minute. Das LD.sub.90 von SSCrFCES für LANGSPIELPLATTE-Tödlichkeit in den Mäusen wird bei mu.M 2 erzielt. Diese Resultate zeigen die Endotoxin-neutralisierende Fähigkeit von SSCrFCES in vitro und in vivo, sowie sein Potential für Gebrauch in der Behandlung des Endotoxin-verursachten septischen Schlages. Auch in dieser Anwendung gestellt der Gebrauch der Sushipeptide und ihrer Durch Mutation entstehende Variation Ableitungen als starke Antimicrobials dar. Weiteres dargestellt worden in dieser Anwendung ist der Gebrauch der Sushipeptide oder der recombinant Proteine der Sushi, Endotoxin von den Flüssigkeiten zu entfernen.
