Inducible site-specific recombination for the activation and removal of transgenes in transgenic plants

   
   

Disclosed is an inducible promoter system in conjunction with a site-specific recombination system which allows (i) specific activation of transgenes at specific times or (ii) excision and removal of transgenes (e.g., antibiotic resistance markers) from transgenic plants. These "suicide" gene cassettes, including the recombination system itself, can be evicted from the plant genome once their function has been exerted. The system is based on the ability to temporally and spatially induce the expression of CRE recombinase which then binds to directly repeated lox sites flanking the transgene in question leading to the precise excision of the gene cassette. Also disclosed is a method to activate an inverted, and therefore silent, transgene by placing two lox sites in opposite orientations flanking the transgene. This results in inversion of the intervening DNA fragment in the presence of CRE recombinase. This activation can be timed by placing the CRE recombinase under the control of an inducible promoter.

È rilevato un sistema viscoelastico del promotore insieme con un sistema di ricombinazione di site-specifico che permette (i) l'attivazione specifica dei transgenes ai tempi specifici o (ii) l'asportazione e la rimozione dei transgenes (per esempio, indicatori antibiotici di resistenza) dalle piante transgenic. Questi vassoi del gene "di suicide", compreso il sistema in se di ricombinazione, possono evicted dal genome della pianta una volta che la loro funzione è stata impiegata. Il sistema è basato sull'abilità a temporaneamente e nello spazio induce l'espressione del recombinase di CRE che allora si lega ai luoghi direttamente ripetuti del lox che fiancheggiano il transgene in questione che conduce all'asportazione precisa del vassoio del gene. Inoltre è rilevato un metodo per attivare invertita e quindi silenzioso, transgene disponendo due luoghi del lox negli orientamenti opposti che fiancheggiano il transgene. Ciò provoca l'inversione del frammento d'intervento del DNA in presenza del recombinase di CRE. Questa attivazione può essere cronometrata disponendo il recombinase di CRE sotto il controllo di un promotore viscoelastico.

 
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