A method is provided for long term culture of proliferating hepatocytes
that retain hepatic function to produce a hepatic cell culture.
Hepatocytes and nonparenchymal cells are co-cultured ex vivo on a matrix
coated with a molecule that promotes cell adhesion, proliferation or
survival, in the presence of growth factors, resulting in a long-term
culture of proliferating hepatocytes that retain hepatic function. The
co-culturing method results in the formation of matrix/hepatic cell
clusters that may be mixed with a second structured or scaffold matrix
that provides a three-dimensional structural support to form structures
analogous to liver tissue counterparts. The method can be used to form
bio-articial livers through which a subjects blood is perfused. In an
embodiment, the hepatocytes and nonparenchymal cells are derived from
disaggregated liver tissue and are co-cultured in the presence of
epidermal growth factor or heptocyte growth factor and beads coated with
extracellular matrix protein, Alternatively, the hepatic cell culture may
be implanted into the body of a recipient host having a hepatic disorder.
Such hepatic disorders, include, for example, cirrhosis of the liver,
induced hepatitis, chronic hepatitis, primary sclerosing cholangitis and
alpha.sub.1 antitrypsin deficiency.
Un metodo è fornito per coltura di lunga durata dei hepatocytes di proliferazione che mantengono la funzione epatica a prodotti una coltura epatica delle cellule. Hepatocytes e le cellule nonparenchymal sono ex vivo co-coltivato su una tabella ricoperta di molecola che promuove l'adesione, la proliferazione o la sopravvivenza delle cellule, in presenza dei fattori di sviluppo, con conseguente coltura di lunga durata dei hepatocytes di proliferazione che mantengono la funzione epatica. Il metodo co-coltivante provoca la formazione delle serie di ingranaggi delle cellule di matrix/hepatic che possono essere mescolate con seconda strutturata o della tabella dell'impalcatura che fornisce un supporto strutturale tridimensionale alle strutture della forma analoghe alle controparti del tessuto del fegato. Il metodo può essere usato per formare i bio--articial fegati tramite cui un'anima degli oggetti perfused. In un incorporamento, i hepatocytes e le cellule nonparenchymal sono derivati dal tessuto disgregato del fegato e co-sono coltivati in presenza del fattore epidermico di sviluppo o il fattore ed i branelli di sviluppo del heptocyte ricoperti di proteina extracellulare della tabella, alternativamente, la coltura epatica delle cellule possono essere impiantati nel corpo di un ospite recettivo che ha un disordine epatico. _ tale epatico disordine, includ, per esempio, cirrosi fegato, indur epatite, cronico epatite, primario sclerotico colangite e alpha.sub.1 antitrypsin mancanza.
