The present invention relates to a method for quickly determining cAMP
content or an adenylate cyclase activity in a biological sample containing
non-cyclic adenine nucleotides without the use of radioactive agents.
Particularly, the present invention provides a method of determining cAMP
content or an adenylate cyclase activity in a biological sample containing
non-cyclic adenine nucleotides selected from the group consisting of cAMP
produced by endogenous adenylate cyclase, and AMP, ATP, ADP and a mixture
thereof, which comprises (1) combining a biological sample with effective
amounts of apyrase, adenosine deaminase and alkaline phosphatase to
enzymatically remove non-cyclic adenine nucleotides other than cAMP, and
glucose-6-phosphate in the sample; (2) enzymatically converting cAMP into
AMP; (3) determining an amount of AMP without the use of radioactive
agents, and a kit to carry out the method.
De onderhavige uitvinding heeft op een methode om snel inhoud AMP of een adenylate cyclase activiteit in een biologische steekproef betrekking te bepalen die niet cyclische adenine nucleotiden zonder het gebruik van radioactieve agenten bevat. In het bijzonder, verstrekt de onderhavige uitvinding een methode om inhoud AMP of een adenylate cyclase activiteit in een biologische steekproef die niet cyclische adenine geselecteerde nucleotiden bevat van de groep te bepalen die uit AMP bestaat die door endogene adenylate cyclase daarvan wordt geproduceerd, en AMP, ATP, ADP en een mengsel, dat uit (1) combinerend een biologische steekproef met efficiƫnte hoeveelheden apyrase, adenosine deaminase en alkalische phosphatase bestaat om niet cyclische adenine nucleotiden buiten AMP enzymatisch te verwijderen, en glucose-6-fosfaat in de steekproef; (2) enzymatisch omzettend AMP in AMP; (3) het bepalen van een hoeveelheid AMP zonder het gebruik van radioactieve agenten, en een uitrusting om de methode uit te voeren.