The present invention relates to the detection of the presence of reverse
transcriptase enzymatic activity in eukaryotic cell lines. Specifically,
the present invention comprises a method for discriminating between
endogenous reverse transcriptase activity in a substrate cell line (e.g.,
avian) used as substrates for the manufacture of biological products
(including viral vaccines) from exogenous infectious retrovirus by using a
combination of transmissibility assay (viral replication) and PBRT assay
(RT-PCR). Appropriate levels of viral amplification and number of PCR
cycles are determined and employed that permit detection of exogenous
infectious RT activity but not endogenous RT activity.
A invenção atual relaciona-se à deteção da presença da atividade enzymatic do transcriptase reverso em linhas eukaryotic da pilha. Especificamente, a invenção atual compreende um método para discriminar entre a atividade reversa endogenous do transcriptase em uma linha da pilha da carcaça (por exemplo, avian) usada como carcaças para a manufatura de produtos biológicos (vacinas viral including) do retrovirus infectious exogenous usando uma combinação do assay do transmissibility (replication viral) e do assay de PBRT (RT-PCR). Os níveis apropriados do amplification viral e o número de ciclos de PCR são determinados e empregados que deteção da licença da atividade infectious exogenous do RT mas da atividade nao endogenous do RT.
