Rolling circle amplification (RCA) has been useful for detecting point
mutations in isolated nucleic acids, but its application in cytological
preparations has been problematic. By pretreating cells with a combination
of restriction enzymes and exonucleases, we demonstrate RCA in solution
and in situ to detect gene copy number and single base mutations. It can
also detect and quantify transcribed RNA in individual cells, making it a
versatile tool for cell-based assays.
Амплификация круга завальцовки (RCA) полезна для обнаруживать перегласовки пункта в изолированных нуклеиновых кислотах, но свое применения в цитологических подготовках проблемна. Путем pretreating клетки с комбинацией энзимов и exonucleases ограничения, мы демонстрируем RCA в разрешении и in situ обнаружить номер экземпляра гена и одиночные низкопробные перегласовки. Он может также обнаружить и квантифицировать транскрибированный RNA в индивидуальных клетках, делая им разносторонний инструмент для cell-based assays.
