The present invention provides methods and compositions that enable the
experimental determination as to whether any gene in the genome of a
diploid pathogenic organism is essential, and whether it is required for
virulence or pathogenicity. The methods involve the construction of
genetic mutants in which one allele of a specific gene is inactivated
while the other allele of the gene is placed under conditional expression.
The identification of essential genes and those genes critical to the
development of virulent infections, provides a basis for the development
of screens for new drugs against such pathogenic organisms. The present
invention further provides Candida albicans genes that are demonstrated to
be essential and are potential targets for drug screening. The nucleotide
sequence of the target genes can be used for various drug discovery
purposes, such as expression of the recombinant protein, hybridization
assay and construction of nucleic acid arrays. The uses of proteins
encoded by the essential genes, and genetically engineered cells
comprising modified alleles of essential genes in various screening
methods are also encompassed by the invention.
A invenção atual fornece os métodos e as composições de que permita a determinação experimental a respeito se qualquer gene no genome de um organismo pathogenic diploid é essencial, e se se requer para o virulence ou o pathogenicity. Os métodos envolvem a construção dos mutants genetic em que um allele de um gene específico inactivated quando o outro allele do gene for colocado sob a expressão condicional. A identificação de genes essenciais e aqueles de genes críticos ao desenvolvimento de infecções virulent, fornece uma base para o desenvolvimento das telas para drogas novas de encontro a tais organismos pathogenic. A invenção atual mais adicional fornece os genes dos albicans do candida que são demonstrados para ser essenciais e são alvos potenciais para a seleção da droga. A seqüência do nucleotide dos genes do alvo pode ser usada para várias finalidades da descoberta da droga, tais como a expressão da proteína recombinant, o assay do hybridization e a construção de disposições do ácido nucleic. Os usos das proteínas codificados pelos genes essenciais, e as pilhas genetically projetadas que compreendem alleles modificados de genes essenciais em vários métodos de seleção são abrangidos também pela invenção.
