The present invention provides substantially pure DNA's comprised of
sequences which encode proteins having the hormone-binding and/or
transcription-activating characteristics of a glucocorticoid receptor, a
mineralocorticoid receptor, or a thyroid hormone receptor. The invention
also provides various plasmids containing receptor sequences which
exemplify the DNA's of the invention. The invention further provides
receptor proteins, including modified functional forms thereof, expressed
from the DNA's (or mRNA's) of the invention.
In addition to novel receptor DNA, RNA and protein compositions, the
present invention involves a bioassay for determining the functionality of
a receptor protein. By using our bioassay system we have discovered that a
necessary and sufficient condition for activation of transcription of a
gene (G), whose transcription is activated by hormones complexed with
receptors, is the presence of the hormone and its receptor in the cell (C)
where (G) is located. As a result of that discovery we have also invented
new methods for producing desired proteins in genetically engineered
cells. Two of these methods are methods of the present invention. The
first is a method for inducing transcription of a gene whose transcription
is activated by hormones complexed with the receptors. The second is a
method for engineering a cell and increasing and controlling production of
a protein encoded by a gene whose transcription is activated by hormones
complexed with receptor proteins.
Η παρούσα εφεύρεση παρέχει του ουσιαστικά καθαρού DNA που αποτελείται από τις ακολουθίες που κωδικοποιούν τις πρωτεϊ'νες που έχουν την ορμόνη-δέσμευση ή/και μεταγραφή-που ενεργοποιούν τα χαρακτηριστικά ενός glucocorticoid δέκτη, ενός mineralocorticoid δέκτη, ή ενός δέκτη ορμονών θυροειδή. Η εφεύρεση παρέχει επίσης τα διάφορα πλασμίδια που περιέχουν τις ακολουθίες δεκτών που εξηγούν τα DNA της εφεύρεσης. Η εφεύρεση παρέχει περαιτέρω τις πρωτεϊ'νες δεκτών, συμπεριλαμβανομένων των τροποποιημένων λειτουργικών μορφών επ' αυτού, που εκφράζονται από του DNA (ή mRNA's) της εφεύρεσης. Εκτός από το νέο DNA δεκτών, το RNA και τις πρωτεϊνικές συνθέσεις, η παρούσα εφεύρεση περιλαμβάνει μια βιολογική ανάλυση για τον καθορισμό της λειτουργίας μιας πρωτεϊ'νης δεκτών. Με τη χρησιμοποίηση του συστήματος βιολογικής ανάλυσής μας έχουμε ανακαλύψει ότι ένας απαραίτητος και ικανοποιητικός όρος για την ενεργοποίηση της μεταγραφής ενός γονιδίου (G), η του οποίου μεταγραφή ενεργοποιείται από τις ορμόνες που περιπλέκονται με τους δέκτες, είναι η παρουσία της ορμόνης και δέκτη του στο κύτταρο (C) όπου (G) βρίσκεται. Ως αποτέλεσμα εκείνης της ανακάλυψης έχουμε εφεύρει επίσης τις νέες μεθόδους για τις επιθυμητές πρωτεϊ'νες στα γενετικά κατασκευασμένα κύτταρα. Δύο από αυτές τις μεθόδους είναι μέθοδοι της παρούσας εφεύρεσης. Ο πρώτος είναι μια μέθοδος για τη μεταγραφή ενός γονιδίου η του οποίου μεταγραφή ενεργοποιείται από τις ορμόνες που περιπλέκονται με τους δέκτες. Ο δεύτερος είναι μια μέθοδος για την εφαρμοσμένη μηχανική ένα κύτταρο και μια αυξανόμενη και ελέγχοντας παραγωγή μιας πρωτεϊ'νης που κωδικοποιείται από ένα γονίδιο η του οποίου μεταγραφή ενεργοποιείται από τις ορμόνες που περιπλέκονται με τις πρωτεϊ'νες δεκτών.
